HifectinII真核转染试剂      C1505

常温运输，4 oC 1年稳定。

 

HiGene 细胞转染试剂       C1506

常温运输，4 oC 1年稳定。

 

HiGene 在体转染试剂       C1507    

常温运输，4 oC 1年稳定。

 

HiGene II 细胞转染试剂     C1508    

常温运输，4 oC 1年稳定。

 

HEK293（T）转染试剂        C1512

常温运输，4 oC 1年稳定。

 

Hifectin?通用型转染试剂    AP0001

常温运输，4 oC 1年稳定。

 

 

描述：HiGene是经过特殊交联修饰的新一代阳离子聚合物，其高密度阳离子基团与带负电的核酸结合形成致密的纳米复合物，通过内吞入胞。在细胞内HiGene有效缓冲内吞小体的pH，保护核酸免受降解，并高效介导基因转运到胞浆胞核表达。HiGene有血清转染效率更高，并允许细胞在铺板时或铺板后立即转染，其卓越的in vitro和in vivo转染能力堪比jetPEI、Lipofectamine 2000、ExGen 500、FuGENE、Polyfect、SuperFect等转染试剂。HiGene是广谱转染试剂，可转染的细胞包括A497,A549, BHK, Caco-2, C-26, C2C12, C3H/10T, CHO, COS1, COS7, Sf9, HeLa, HEK293, HT-29, MCF7, NIH3T3, Jurkat, K562, RAW264.7, THP1, U937, PC12, L929, SHY-5Y, Vero,原代神经元、原代肝细胞、皮肤成纤维细胞、人牛血管内皮细胞、单核/巨噬细胞、人胚胎干细胞等。HiGene高效转染siRNA或寡聚核苷酸，并有优异的整体动物转染能力，介导基因在心肺肾肝脾等各种组织高效表达。

 

特征：

2  有血清转染，转染前后可不更换培养基

2  细胞铺板时立即转染，节省时间

2  媲美Lipofectamine 2000, jetPEI, FuGENE

2  高效转染siRNA、DNA、寡聚核苷酸

2  in vitro转染细胞谱广，包括各种原代细胞和神经元

2  in vivo动物转染，心肺肾肝脾等高效表达

 

自备试剂：无菌150mM NaCl即0.9%生理盐水或无菌蒸馏水或PBS缓冲液，用于离体细胞转染制备转染混合物。5%无菌葡萄糖，用于离体或在体转染转染混合物制备。与复合物颗粒形成有关，勿用其它缓冲液替代。

 

DNA、siRNA和寡聚核苷酸：建议溶于灭菌蒸馏水。质粒DNA高纯度OD260/280 ~1.8，无内毒素。可用内毒素清除剂(#D1501)清除内毒素。寡聚核苷酸和用于RNA干扰(siRNA)的核苷酸，可单独或与质粒DNA共转染，但必须使用经HPLC或凝胶洗脱纯化去除杂链的高纯度片段。siRNA和寡聚核苷酸与DNA转染及优化操作相似，但对其用量进行细致的优化很重要。

 

细胞准备（重要!）

接种细胞数：参见附表细胞计数接种。培养时间：转染前应培养~24h，使之处于分裂和旺盛生长期。细胞密度与转染时机：培养~24h后，细胞覆盖培养皿表面积的70~90%时为转染最佳时机。低密度细胞的转染率并不低，但总细胞数少因而蛋白表达总量也不会很高。在较高细胞密度时转染较好，但100%长满的细胞转染效率很低，因此接种细胞要均匀，以减少因局部紧密接触而致生长抑制的难转染细胞，否则最好重头接种细胞。HiGene允许在细胞铺板时或铺板后立即转染，效果与贴壁后转染相似，但大大节省时间和劳动，适合高通量筛选。甚至一些难转染细胞也可尝试此即时转染方法。血清和培养基：HiGene具有卓越的转染能力，血清和抗生素不影响转染，在10~30%血清培养基转染表达效率更高。转染混合物体积为培养基的1/10，参见表第5栏。如果培养基未明显变黄，转染前可不更换。如转染结果满意，转染后无需更换培养基。但转染混合物稀释了培养基，转染4~8小时后换培养基会可进一步增加转染效率。