4-氨基丁酸
(1)原料预处理过程:将茶叶作为原料进行清洗除杂脱酚,杀青烘干后粉碎备用;将鲜叶清洗并晾晒至含水量约 80%,分别将鲜叶在-18℃条件下处理16 h,然后用微波炉杀青 2-3 min(使用中高档,每 30 s 翻匀一次),然后放入鼓风干燥箱中在 80 ℃下烘至绝干,粉碎过 80 目筛。或者将鲜叶清洗并晾晒至含水量约 80%,分别将鲜叶在-18℃条件下处理16 h,然后用微波炉杀青 2-3 min(使用中高档,每 30 s 翻匀一次),然后放入鼓风干燥箱中在 80 ℃下烘至绝干,粉碎过 80 目筛。
(2)γ-氨基丁酸浸提过程:低频超声辅助碱提,制得γ-氨基丁酸提取液,具体过程为:称取一定量茶粉置于锥形瓶中,按照液料比20:1 mL/g 加入一定量超纯水后摇匀,在温度为 50 ℃,功率为 220 W 条件下超声浸提 30 min 冷却后离心,抽滤,得到γ-氨基丁酸粗提液;
(3)γ-氨基丁酸浓缩过程:用旋转蒸发仪将γ-氨基丁酸粗提液浓缩,加水配制成所需样品液浓度。采用真空浓缩或者旋转蒸发浓缩,真空浓缩温度控制在40-60℃,浓缩至原体积的20-50%。旋转蒸发浓缩时间为2h
(4)γ-氨基丁酸浓缩液的分离纯化过程:可采用静态吸附或者动态洗脱进行分离纯化;中静态吸附具体为:一定体积的树脂,加入 95%乙醇浸泡 24 h,用水洗至无絮状物且无乙醇味;然后用 4% NaOH 浸泡 5 h,用水洗至中性,再用 5% HCl 浸泡 8 h,用水洗至中性;动态吸附洗脱过程为:上样流速 3mL/min,上样浓度 0.2 mg/mL,洗脱液 pH=9,洗脱流速 2 mL/min。在此条件下,γ-氨基丁酸 的保留率为 80.06%,γ-氨基丁酸 的纯度达到78.51%。
(5)γ-氨基丁酸干燥和保存的过程;向上述所得的γ-氨基丁酸沉淀中加入20~60倍沉淀重量的纯净水,室温下洗涤6~8次,5000-11000r/min离心分离30min,得γ-氨基丁酸,加入5~15倍重量的纯净水,经搅拌调节pH至中性,再过胶体磨和均质机,喷雾干燥或冷冻干燥得γ-氨基丁酸产品。
通过此法得到的γ-氨基丁酸不仅纯度高,原始营养物质也保存较为完整,适合大面积推广。