DNA 退火缓冲液(5×)

简介：

DNA 寡核苷酸退火缓冲液(Annealing Buffer for DNA Oligos)简称为 DNA 退火缓冲液，是一种可用于 DNA oligo 退火的缓冲液，可用于常规的 DNA oligo 的退火，尤其适合于较难退火的用于 RNAi (也称 siRNA) 质粒构建的 DNA oligo的退火。

BIOISCO Annealing Buffer for DNA Oligos(5×)能有效避免 DNA oligo 自身形成发夹结构，并且两条 oligo 退火后可以直接和经酶切、纯化的质粒连接，转化后可以得到大量的阳性克隆。该本试剂操作简单，只需把待退火的 DNA oligo 和 Annealing Buffer for DNA Oligos(5×)按照一定比例混合后，置于 PCR 仪上进行程序降温，约90min 即可完成。

组成：

保存条件：

-20℃保存,12个月有效。

操作步骤(仅供参考)：

1、把待退火的 DNA oligo 用经灭菌的超纯水或 Nuclease-Free Water 配制成 50μM ，同时溶解 Annealing Buffer for DNA Oligos(5×)，混匀备用。

2、按如下退火反应体系操作：

Nuclease-Free Water	40μl
Annealing Buffer for DNA Oligos(5×)	20μl
DNA oligo A(50 μM)	20μl
DNA oligo B(50 μM)	20μl
Tatal	100μl

按照上述顺序，依次加入并混匀，如果所用 PCR 仪没有加热盖，可加入 Mineral Oil防止液体挥发。

3、 按如下 PCR 仪的退火条件：

步骤	温度	时间	作用
1	95℃	2min	Oligo 充分变性
2	每 90s 下降 1℃，降至 25℃	约 90min	程序退火
3	4℃	长期保存	暂时存放

4、退火后可直接用于连接反应，也可以-20℃冻存备用。如果退火结束后打算进行酶切等其它反应，最好用纯化试剂盒进行纯化，或者确保退火产物在反应体系中体积不超过 5% ，以避免 Annealing Buffer 对后续的酶反应体系的干扰。

注意事项：

1、避免反复冻融，以免效率下降。

2、该试剂只适合于 DNA oligo 的退火，不适用于 RNA oligo 的退火。

3、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

4、本产品仅由于科研，严禁他用。