conn改良Weigert革兰染色液

简介：

革兰氏染色法是丹麦医生 Christain Gram 于 1884 年所发明，是细菌学中广泛使用的一种鉴别染色法，亦是一种复染法。经结晶紫染色的细胞用碘液处理后形成不溶性复合物，乙醇能使它脱色。在同样染色环境中利用细菌不同的等电点(Gram 阳性细菌等电点为pH2.0~3.0，Gram阴性细菌等电点为 pH4.0~5.0) ，阳性细菌带的负电荷比阴性细菌带的负电荷多，与带正电荷的碱性染料如结晶紫结合较牢，再加入媒染剂(碘)进入菌体后，与染料结合形成不溶于水的结晶紫-碘-蛋白复合物，并与阳性菌菌体内的核糖核酸镁盐结合，使已着色的细菌不易脱色。Conn 改良 Weigert 革兰染色液是在经典的革兰染色配方进行改进，使用胭脂红染色液，该法也是在草酸铵结晶紫法演化过来的，可以区分 Gram 阳性细菌和阴性细菌，尤其适用于鉴别细菌和非细菌的蓝色微颗粒状物质(如钙盐)。

组成：

保存条件：

室温避光保存,12个月有效。

操作步骤(仅供参考)：

1、组织固定于10% 福尔马林中，常规脱水包埋。

2、切片厚 4μm，常规脱蜡至水。

3、胭脂红染色液滴染切片，倾去染液。

4、酸性乙醇分化。

5、流水冲洗。

6、草酸铵结晶紫染色液滴染，倾去染液。

7、用滤纸稍吸干切片周围余液。

8、Weigert 碘液处理切片，倾去碘液。

9、用滤纸反复吸干切片内水分。

10、苯胺二甲苯溶液分化至切片无紫色脱出，立即用二甲苯洗涤，并在镜下观察。

11、滴入新的二甲苯反复洗涤多次，彻底把苯胺洗去。

12、中性树胶封固。

染色结果：

革兰阳性细菌和纤维素：蓝紫色

革兰阴性细菌：红色

细胞核：红色

注意事项：

1、切片在胭脂红染色液中染色后不用水洗，直接滴入酸性乙醇进行分化并固定。

2、用苯胺二甲苯溶液分化时，可轻轻摇动切片使分化均匀。

3、经二甲苯冲洗后，应在镜下观察。如分化不足，可再滴入苯胺二甲苯继续分化，至 Gram阳性菌清晰为止，但注意不要分化过度。

4、最后用二甲苯反复洗涤切片，把苯胺彻底清除。切片若残留少量苯胺，以后就容易褪色。

5、Gram 染色阳性的细菌必须具有未受损的细菌壁，如细菌壁受破损，则染色呈阴性。

6、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

7、本产品仅由于科研，严禁他用。