Hoechst33342 染色液(含封片剂)

简介：

Hoechst 33342 也称 bisBenzimide H 33342 或 HOE 33342 。分子式为 C₂₇H₂₈N ₆O ·3HCl ·3H ₂O ，分子量为 615.99，CAS Number 23491-52-3。Hoechst 33342 是一种可以穿透细胞膜的蓝色荧光染料，对细胞的毒性较低，常用于细胞凋亡检测，染色后用荧光显微镜观察或流式细胞仪检测。Hoechst 33342 也用于普通的细胞核染色、DNA 染色。Hoechst 33342 的最大激发波长为，最大发射波长为，Hoechst 33342 和双链 DNA结合后，最大激发波长为， 最大发射波长为。 BIOISCOHoechst33342 染色液(含封片剂)可直接用于固定细胞或组织的细胞核染色，也可直接用于活细胞或组织的细胞核染色，无需封片操作。

组成：

保存条件：

RT避光。

自备材料：

1、荧光显微镜

2、蒸馏水

3、微量移液器

4、PBS 或生理盐水

操作步骤(仅供参考)：

(一)固定的组织细胞染色

1、对于细胞或组织样品，固定后冲洗去除固定剂。如果需要进行免疫荧光染色，则先进行免疫荧光染色，染色完毕后再按后续步骤进行 Hoechst 33342 染色，如果不需要进行其它染色，则直接进行后续的 Hoechst 33342 染色。对于贴壁细胞或组织切片，加入少量Hoechst33342 染色液(含封片剂)，覆盖住样品即可。对于悬浮细胞，至少加入待染色样品3 倍体积以上的 Hoechst33342 染色液(含封片剂)，充分混匀。

2、室温放置。

3、轻轻吸除 Hoechst33342 染色液(含封片剂)。

4、用无菌的 PBS 或生理盐水清洗。

5、无需封片，直接在荧光显微镜下观察。

(二)活细胞染色

1、取 96 、24 、6 孔板培养细胞至合适状态，按96 孔板加入 100 μl、24 孔板加入 500 μl、 6 孔板加入 1ml 的比例，加入适当的 Hoechst 33342 染色液，染液必须充分覆盖住细胞。

2、在适宜于细胞培养的条件下培养。

3、轻轻吸取 Hoechst33342 染色液(含封片剂)。

4、用无菌的 PBS 或生理盐水清洗。

5、无需封片，直接在荧光显微镜下观察。染色结果：细胞发生凋亡时，会看到凋亡细胞的细胞核呈致密浓染，或呈碎块状致密浓染。

注意事项：

1、Hoechst33342 染色液(含封片剂)的浓度适用于各种常规染色的需要。

2、荧光染料都存在淬灭的问题，建议染色后尽快检测。

3、避免反复冻融，否则容易失效。

4、Hoechst 33342 对人体有一定刺激性，请注意适当防护。

5、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

6、本产品仅用于科研，严禁他用。