尼氏染色试剂盒(Nissol stain,焦油紫法)
简介:
神经元细胞体包括一个具有皱褶核膜的大细胞核、稀疏的染色质和一个明显的核仁。在 细胞体中,细胞质是尼氏颗粒,即能够代表粗面内质网并在很多神经元中产生特异的斑点状 嗜碱性表现的嗜碱性颗粒。尼氏颗粒可以用很多染色来显示,例如中性红、亚甲基蓝、甲苯 胺蓝和甲基紫等。染色的变异、pH 和分化的时间使一些染色既可以仅突出尼氏物质,也可 以包括神经元的细胞核和神经胶质。 尼氏体(Nissl body)或称尼氏小体是分布于神经细胞胞质内的三角形或椭圆形小块状 物质,能被碱性染料如硫堇、亚甲蓝、甲苯胺蓝和焦油紫等染料染成紫蓝色。各种神经细胞 内都含有尼氏体,但其形状、数量、分布位置常常不同。
尼氏体也存在于树突中,但不在于 轴突和包体的轴丘。另外,尼氏体会因为生理状态的变化而变化,尼氏体是神经元内合成蛋 白质合成的重要部位,当神经元受到刺激后,包体内的尼氏体会明显减少。 焦油紫法尼氏染色操作简便、染色稳定、适用范围广,可以用于石蜡组织切片的尼氏物 质、神经元等的染色,尼氏体的存在和消失是神经细胞是否受损的重要指标,当发生脑炎、脑缺血、轴突反应等情况,尼氏体会发生溶解,甚至消失。 本试剂盒采用焦油紫(Cresyl violet)作为核心染料,焦油紫具有感光作用,能够很好 地显示尼氏体的变化。
组成:
产品名称
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SN020-2×100ml
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Storage
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试剂(A): Cresyl violet stain
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100ml
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RT 避光
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试剂(B): Nissol Differentiation
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100ml
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RT
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说明书
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一份
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试剂(A): 主要由焦油紫(Cresyl violet)等组成。试剂(B): 主要由弱酸、乙醇等组成。
保存条件:
室温,避保存,12个月有效
自备材料:
1、无水乙醇
2、温箱或水浴锅
3、酒精灯
4、蒸馏水
5、显微镜
操作步骤(仅供参考):
1、新鲜组织固定于乙醇、Carnoy 固定液或中性福尔马林溶液后,常规脱水包埋。
2、切片厚 5μm,常规脱蜡至水。
3、切片置于 Cresyl violet stain 中,并将染缸置于 56℃温箱内浸染 1h,酒精灯上 加温使切片冒气泡为止(大约 10min)。
4、蒸馏水或去离子水冲洗。
5、Nissol Differentiation 分化 1~3min,在显微镜下观察,至背景接近于无色为止。
6、无水乙醇迅速脱水。
7、二甲苯透明。
8、中性树胶封固。
预期结果:
尼式体染成紫色,背景接近于无色。
注意事项:
1、尼氏体离体后容易溶解,所以组织取出后应立即固定,否则难以着色。
2、组织固定起着非常重要的作用,固定可采用乙醇、Carnoy 固定液或中性福尔马林溶液。
3、本染色液对石蜡组织切片尼氏染色效果较好。
4、石蜡切片厚度7~10μm或25μm(皮质神经元密度的评估要用25μm 厚的切片)。
5、染色后的标本务必避光保存,否则容易褪色。
6、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
7、本产品仅由于科研,严禁他用。