葡萄糖-6- 磷酸酶染色液( 铅法)

简介：

葡萄糖-6-磷酸酶(glucose-6 –phosphatase，G-6-Pase)是一种多存在于哺乳类动物肝、肾、 肠等组织的膜结合酶，G-6-Pase 和微体紧密结合，定位于内质网，是内质网的主要标志酶， 能把葡萄糖-6-磷酸水解成葡萄糖和磷酸。G-6-Pase 对维持血糖浓度的相对恒定有至关重要 的作用，是糖代谢的关键酶。当血糖降低时，G-6-Pase 促进肝糖原转变为血糖。当缺乏 G-6-Pase 时，会引起糖原分解障碍，使糖原积累在肝、肾、心脏等部位，导致肝糖原储积 病。G-6-Pase 最适 pH 为 6.5，在 pH6.0～8.0 亦可，pH8.0 最稳定，pH5.0 易变性。组 织化学反应多用 pH6.5～6.7。

葡萄糖-6-磷酸酶染色液(铅法)采用重金属捕捉剂和磷酸结合显示酶的活性。该酶对固定很 敏感，组织经 80%乙酸溶液固定后用石蜡包埋，G-6-Pase完全被抑制。需用新鲜组织低温 恒冷切片，经甲醛短时固定酶即失活，但可短时低温丙酮固定，但一般不固定。

组成：

保存条件：

4℃,避光保存,6个月有效。

操作步骤(仅供参考)：

1.冰冻切片入蒸馏水清洗。

2.入 G-6-Pase 孵育液 37℃孵育 20min。

3.自来水冲洗后，蒸馏水冲洗。

4.在上述过程中配制ALP硫化工作液，即取试剂(B)用蒸馏水稀释 50 倍, 即为 ALP 硫化 工作液，即配即用。切片入硫化工作液，孵育 1min。

5.自来水水洗。

6.(可选)入固定液，固定 2min。

7.入蒸馏水水洗 2 次。

8.甘油明胶封片。

染色结果：

G-6-Pase 活性处 棕色沉淀

阴性对照(可选)：

将切片置入试剂(D)- G-6-Pase 对照液中，其余步骤相同，结果为阴性。

注意事项：

1. ALP 硫化液易失效，最好分成小分储存，一经开启立即使用。

2. ALP 硫化液具有腐蚀性和刺激性气味，应小心操作。

3. 对冰冻切片染色时，应减少切片在室温暴露的时间。

4. 本染色液适用于冰冻切片，一般不固定，也可染色后固定，固定步骤非必须步骤。

5. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

6.本产品仅由于科研，严禁他用。