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货号 | CAS号 | 编号 | 包装 | 参数 | 库存 | 补货期 | 价格 |
BK2021080901 | CAS | BK2021080901 | 100 | 0 |
直径:200nm配体:抗生物素蛋白(来自鸡蛋清)
基质:GMA/DVB
AvidinAvidin在2-8℃(最多3个月)储存在缓冲液(25mM tris-HCl,0.15M NaCl,0.05%吐温20,0.09%NaN 3,pH 7.2)中。不要冻结试剂。重要产品信息
注意:这些洗脱条件可能会不可逆转地损害目标蛋白质。如果需要使用非变性条件洗脱生物素化分子,请使用单体抗生物素蛋白磁珠,其允许温和的洗脱条件以回收生物素化的分子而不会受到抗生物素蛋白亚基的污染,并且不会降低树脂的结合能力。
A.所需的其他材料
?生物素化抗体:使用约30μg生物素化蛋白/ mg珠。在结合缓冲液中制备浓度为0.2-10mg / mL的0.1-1.2mg生物素化抗体。
注意:所需抗原的量和孵育时间取决于所用的抗体 - 抗原系统,并且必须针对每个特定系统进行优化。为了适当混合,确保总反应体积不能完全填充微量离心管。
1.将Avidin磁珠和试剂平衡至室温。
2.为了形成免疫复合物,将生物素化抗体加入样品或裂解液中,在室温下孵育至少30分钟或在4℃下孵育过夜。
3.轻轻旋转Avidin磁珠瓶,以获得均匀的悬浮液。将适量的珠浆移液到微量离心管中。磁性分离并丢弃上清液。
4.加入结合缓冲液洗涤Avidin磁珠两次,磁力分离2分钟。丢弃上清液。
5.将免疫复合物添加到珠子中并在室温或4℃下混合孵育1小时。
6.用结合缓冲液洗涤抗生物素蛋白结合的复合物并磁力分离2分钟。丢弃上清液。重复此洗涤程序至少四次。
7.样品可以在SDS-PAGE样品缓冲液中煮沸并电泳用于分析。或者,将洗脱缓冲液加入到珠子中以回收抗原。如果使用0.1M甘氨酸?HCl,pH 2.8,则通过加入适当的浓缩缓冲液如1M Tris,pH 7.5(100μL该缓冲液至1mL样品就足够)立即去除液体并立即调节回收级分的pH。
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