1 um羧基磁珠化学发光磁珠发光免疫磁珠1微米羧基磁球|价格|厂家|多少钱-全球塑胶网-移动端

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BK2021081018	CAS	BK2021081018			100		0

Homo-COOH是均匀的，单一化的超顺磁性1μm直径微球，由高度交联的聚苯乙烯和均匀分布的磁性材料组成。磁珠进一步涂覆有缩水甘油醚的亲水层，将氧化铁隐藏在其中。然后将羧基引入珠子的表面。小的1μm的Homo-COOH具有亲水性表面，可确保低特异性结合，优异的分散能力以及易于在各种缓冲液中处理。这些磁珠还具有高磁性迁移率和低沉降率，使其成为自动化分析的理想选择。 Homo羧基磁珠以水性悬浮液形式提供。

双功能交联剂可用于将其他官能团如硫醇，胺，马来酰亚胺等引入珠子的表面。如果待结合的配体不含伯氨基官能团，则可以通过例如引入。使用5"-氨基修饰的寡核苷酸。请注意，寡核苷酸中的其他氨基基团可能在某种程度上与珠子上的羧酸基团反应，导致通过内部碱基偶联。

Bead diameter:1 μm
Concentration:10 mg/ml (7-12 x 109beads/ml)

三、缓冲液
50 mM MES [2-(N-morpholino)-ethanesulfonic acid], pH 6.0, 0.01% Triton X-100;
EDC [1-ethyl-3-(3-dimethyaminopropyl)-carbodiimide]；
Quench Buffer（淬灭缓冲液）:
Storage Buffer（储存缓冲液）:

以下方案为配体与100μL的 Homo -COOH羧基磁珠的偶联方案。该方案可按需放大或缩小。强烈建议对珠子活化（EDC、EDC / NHS和pH）和偶联条件（配体浓度、偶联缓冲液、pH、反应体积和温育时间）进行优化。
■ 通过涡旋确保磁珠均匀悬浮。
■ 含有0.01％的Triton X-100的50 mM MES缓冲液（pH 6.0）可用作活化和偶联缓冲液。当使用化学合成的寡核苷酸时，寡核苷酸末端应有5"-胺基以偶联磁珠。

该方案被推荐用于将蛋白偶联到羧基磁珠上。首先使用水溶性碳二亚胺（EDC）活化珠上的羧基以形成胺反应性中间体。除去EDC后，加入蛋白质配体并通过蛋白质上的伯胺与磁珠的活化羧基偶联。
2. 涡旋振荡重悬Homo-COOH羧基磁珠。吸取100μL磁珠到1.5mL EP管中，磁分离并吸弃上清。
4. 按步骤3再次清洗羧基磁珠两次。
6. 向磁珠中加入80μL偶联缓冲液和20μL新配的EDC溶液，混匀。室温孵育15分钟，磁分离并吸弃上清。
注意：该步骤应该快速进行，因为磁珠上的胺反应性中间体不稳定。
9. 室温下孵育30分钟。根据配体和浓度的不同，最佳孵育时间可能为0.5?4小时。
11. 向羧基磁珠加入500μL淬灭缓冲液。涡旋20秒，磁分离并吸弃上清。
13. 向羧基磁珠加入500μL淬灭缓冲液。剧烈漩涡20秒，磁分离并吸弃上清。按该步骤再洗两次磁珠。

该方案与上述方案类似，但使用NHS。可通过加入稳定胺反应性中间体的sulfo-NHS来增加EDC介导的反应的效率。
2. 涡旋振荡重悬 Homo-COOH羧基磁珠。吸取100μL磁珠到1.5mL的EP管中，磁分离吸弃上清。
4. 按步骤3再清洗羧基磁珠两次。
6. 向磁珠中加入60μL偶联缓冲液、20μL新配的EDC溶液和20μL新配的Sulfo-NHS溶液。涡旋混匀。
8. 用200μL偶联缓冲液清洗磁珠。涡旋混匀，磁分离并吸弃上清。
10. 将试管放入磁力架中，磁分离并吸弃上清。该上清液含未结合的配体，如果优化方案可保存用于分析。
12. 向羧基磁珠加入500μL淬灭缓冲液。室温孵育30?60分钟。磁分离并吸弃上清。
14. 从磁力架上取下EP管。添加100μL存储缓冲液。涡旋混合并在2?8°C储存偶联好的磁珠。
偶联方案C：一步偶联
1. 确保蛋白或配体在无胺偶联缓冲液中。100μL偶联缓冲液中需50?400μg蛋白或1?5nmol寡核苷酸进行偶联。放在冰上。
3. 加入200μL偶联缓冲液。剧烈漩涡20秒，磁分离并吸弃上清。
5. 从磁力架上取下EP管。在80μL偶联缓冲液中加入50?400μg配体。
7. 使用前用偶联缓冲液配制EDC（50 mg / mL）。
9. 将试管放入磁力架中，磁分离并吸弃上清。该上清含未结合的配体，如果优化方案可以保存用于分析。
11. 向羧基磁珠加入500μL淬灭缓冲液。室温孵育30?60分钟。磁分离并吸弃上清。
13. 从磁力架上取下EP管。添加100μL存储缓冲液。涡旋混合并在2?8°C储存偶联好的磁珠。
部分采用本磁珠文献
p background-color:#ffffff;"="" style="box-sizing: border-box; margin-top: 0px; margin-bottom: 0px;"1. Qiuyuan Lin, Zhipeng Huang, Xin Ye, Bin Yang, Xueen Fang, Baohong Liu, Hui Chen, Jilie Kong,Lab in a tube: Isolation, extraction, and isothermal amplification detection of exosomal long noncoding RNA of gastric cancer, Talanta, Volume 225, 2021, 122090, （羧基聚合物磁珠Homo-COOH偶联抗体）

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