货号 | CAS号 | 编号 | 包装 | 参数 | 库存 | 补货期 | 价格 |
BK2021081032 | CAS | BK2021081032 | 100 | 0 |
Magarose-ProA(ProG、ProA/G、ProL)抗体纯化磁珠系列产品是由NHS活化的磁性琼脂糖微球与Protein A(or Protein G)共价结合形成的复合微粒。与当前国际免疫磁珠市场上同类产品相比,该产品具有更高的抗体结合能力和较低的蛋白非特异吸附率,洗脱条件更均一,一步纯化即可从血清样品中分离出纯度大于90%的抗体。本产品为微米级磁性微球,熟练操作可在15 min内完成抗体吸附过程,30 min内完成抗体纯化流程。本产品可重复使用,适用于血浆、腹水、组织培养上清液等样品中的抗体纯化,也可用于抗体固定及其它相关研究。用户可根据目标抗体的种属来源及亚型选择磁珠的类别,Magarose-ProA(roG、ProA/G、ProL)磁珠与不同抗体的亲和性比较
二、产品特性
注:磁珠蛋白结合量与目标蛋白特性相关,此处仅作参考值。三、使用方法
Binding/Washing buffer PBST(pH 7.2~7.4): 137 mM NaCl,2.7 mM KCl, 10 mM Na2HPO4, 2.0 mM KH2PO4, 0.1% Tween-20;
Neutrilization buffer: 1.0 M Tris-HCl, pH 9.0;
2.操作流程(以纯化人血清IgG为例)
2) 磁珠预处理:将抗体纯化磁珠漩涡振荡30 s,使磁珠充分重悬;取100 μL 10%(v/v)磁珠悬液置于另一新的1.5 mL EP管中。对磁珠悬液进行磁性分离,弃上清液,用1 mL Binding/Washing buffer洗涤2次,磁性分离,管中磁珠可直接用于抗体分离。
3) 抗体吸附:在步骤2预处理的磁珠管中加入步骤1处理的样品溶液,漩涡振荡均匀,在室温下(约25℃)置于翻转混合仪或者手工轻轻翻转EP管,促使样品和磁珠充分接触并吸附,翻转约15 min后进行磁性分离,移弃上清液。
5) 抗体洗脱:在上述完成磁珠洗涤的EP管中加入0.5~1.0 mL Elution buffer,用移液器吹打或者涡旋震荡下迅速重悬,然后在室温下(约25℃)置于翻转混合仪或者手工轻轻翻转EP管,翻转10 min后进行磁性分离,收集上清液至新的EP管。
6) 抗体中和:在步骤5抗体洗脱液中加入一定量的Neutrilization buffer,一般为抗体洗脱体积的1/10,最终使洗脱的抗体pH值保持中性环境,以利于维持抗体的生物活性,避免抗体失活。
1) 磁珠多次使用后会有沉淀蛋白、强疏水性蛋白、脂蛋白等杂质非特异性吸附到磁珠上,为了保证磁珠的使用效率,建议持续使用5次后进行磁珠再生处理。
3) 立即加入1 mL Binding/Washing buffer进行重悬,然后磁性分离,弃上清液,重复该操作3次。
p class="MsoListParagraph" align="left" text-indent:0cm;background-color:#ffffff;"="" microsoft="" yahei",="" arial,="" helvetica,="" sans-serif;="" white-space:="" normal;="" background-color:="" rgb(255,="" 255,="" 255);"="" style="box-sizing: border-box; margin-top: 0px; margin-bottom: 0px; margin-left: 0cm; padding: 5px 0px; line-height: 24px;"4) 加入1 mL Storage buffer重悬磁珠,2~8℃保存。温馨提示:苏州北科震泽供应产品仅用于科研,不能用于人体,部分网站示意图源自互联网,图片仅供参考,请以实际测试结果为准,如有侵权请联系我们立即删除。 |