His-Tag 蛋白纯化磁珠（Magarose-IDA/NTA/TED）针对纯化 His 标签蛋白而研制的一种新型纯化介质，具有高效、快速、方便等特点，可通过磁分离方式直接从生物样品中一步纯化出高纯度的目标蛋白，极大地简化纯化工艺和提高纯化效率，适合科研和工业领域便捷地进行 His-tag 蛋白的纯化。对比传统的过柱层析纯化方式， Magarose NTA磁珠通过磁性分离方式纯化组氨酸标签蛋白，无需对粗蛋白样品进行多次费时费力的离心、过滤步骤，无需装柱和过柱层析，无需昂贵的柱层析设备，在1小时内便能便捷地获得高产量和高纯度的目的蛋白，且能轻松实现多样品平行处理，显著提高了工作效率，大大降低了设备、时间和人工成本。

His-Tag 蛋白纯化磁珠（Magarose-IDA/NTA/TED）磁珠广泛适用于细菌、酵母、昆虫和哺乳动物细胞等分泌或胞内表达的可溶性组氨酸标签蛋白以及变性蛋白的纯化。

二、产品特性

注：IDA结合容量高，耐螯合剂差；NTA结合容量较高，耐螯合剂较好；TED结合容量低，耐螯合剂优异。

1.推荐的缓冲液

Binding Buffer:20mM PBS, 500mM NaCl, 5~20mM咪唑, pH7.4;

Elution Buffer:20mM PBS, 500mM NaCl, 300-500mM咪唑, pH7.4;

Binding Buffer:8M Urea, 50mM NaH2PO4, 100mM Tris·HCl, pH8.0;

Elution Buffer:8 M Urea, 50 mM NaH2PO4, 100mM Tris·HCl, 300-500 mM 咪唑, pH4.5;

2.1组氨酸标签蛋白样品准备（在大肠杆菌下非变性条件下可溶性表达）

1. 酶解：0.2 mg/ml 溶菌酶，20 μg/ml DNase，1 mM MgCl2，1 mM PMSF（终浓度）或其他蛋白酶抑制剂。加入的抑制剂必须对磁珠无影响，4°C混匀30分钟。

3. 调整裂解液的pH到7.4：不要用强碱或酸调节pH（防止沉淀）。

5. 收集上清准备进行后续实验，或是收集离心后的沉淀准备下一步实验。

1. 用1×PBS悬浮细胞（每ml细菌沉淀约5 ml 1× PBS），按照上面的超声条件进行实验。

3. 用Binding/Wash buffer溶解包涵体（每ml包涵体约5 ml Buffer），并在室温下孵育30~60 min。可能需要均质或超声将沉淀完全溶解。

磁珠的使用量由用户根据目标蛋白产量和磁珠载量信息计算获得，这里以获得5-10mg目标蛋白为例：

2. 磁珠平衡：加入5 ml Binding Buffer，反复吹打5-10次，磁分离，待溶液澄清，吸弃清液，重复洗2次。

4. 洗杂：置离心管于磁分离器，待溶液澄清，移出上清液，保留以备取样检测。向离心管中加入10 ml Wash Buffer，反复吹打5-10次，磁分离，待溶液澄清，吸取上清液，保留以备检测。重复洗杂步骤3次以上。

6. 磁珠后处理：加入5 ml Elution Buffer，重悬磁珠，磁分离，吸弃上清，重复该步骤2次。再用5 ml ddH2O反复清洗3-5次。最后，加入2 ml 20%的乙醇溶液，使总体积等于初始磁珠悬浮液的体积，保存于2-8°C。

8. 磁珠再生：磁珠连续使用三次以上，其结合目标蛋白的能力可能会明显降低，建议进行磁珠再生处理。

Washing Buffer（可选）: 0.5 M NaOH, 2 M NaCl

1) 将磁珠悬液磁分离，去除上清，在离心管中加入5 mL ddH2O，重悬磁珠，磁分离去除上清液。

3) 加入5 mL ddH2O，重悬磁珠，磁分离去除上清液，重复此步骤 2次。

5) 加入5 mL Recharge Buffer，重悬磁珠，室温旋转混合20 min，磁性离，去除上清液。

7) 加入2ml 20%的乙醇溶液，使总体积等于初始磁珠悬浮液的体积，保存于2-8°C。

3．注意事项

2) 使用产品前务必充分振荡使磁珠均匀悬浮；

4) 用户可根据实际需要保留经磁性分离移去的上清液，进行取样检测，以便分析纯化过程和优化蛋白纯化流程；

6) 本产品需与磁性分离器配套使用；

p class="MsoListParagraph" align="left" text-indent:0cm;background-color:#ffffff;"="" style="box-sizing: border-box; margin-top: 0px; margin-bottom: 0px; margin-left: 0cm;"7) 本试剂盒仅用于体外实验，不能够用于临床、治疗和动物体内实验等，由此产生的后果概不承担责任。

温馨提示：苏州北科震泽供应产品仅用于科研，不能用于人体，部分网站示意图源自互联网，图片仅供参考，请以实际测试结果为准，如有侵权请联系我们立即删除。