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蛋白A蛋白G琼脂糖凝胶FF是将重组蛋白A蛋白G融合蛋白（r-PAG，NRPA14S）键合在琼脂糖凝胶微球上形成的亲和分离介质。与单独的蛋白A或蛋白G分离介质相比，具有更宽广的结合范围，可以与人的所有IgG亚型、IgA、IgE、IgM结合，但不能与小鼠的IgA、IgM和血清白蛋白结合，适合用于鼠IgG单抗的提取和检测。同时融合后的r-PAG降低对pH的依赖，允许在pH5 ~ 8进行结合。

技术指标：

基质	4%交联琼脂糖凝胶微球
配基	蛋白A蛋白G融合蛋白
配基密度	≥6 mg/ml
填料粒径	60~180 μm
最大流速	800 cm/h
推荐流速	20~100 cm/h
pH稳定性	pH 3~9，pH2~10（清洗）
耐反压	0.3 MPa
载量	≥20 mg/ml IgG
保存条件	2~8℃保存于20%乙醇溶液中

应用举例：

结合缓冲液：20 mM磷酸缓冲液，150 mM NaCl，pH 7.4

洗脱缓冲液：0.1 M Glycine-HCl缓冲液，pH 2.5

中和缓冲液：1 M Tris-HCl，pH 9.0

1)1 ml蛋白A蛋白G琼脂糖凝胶FF预填柱用5 ~ 10个柱床体积的蒸馏水洗去保存液；

2)用结合缓冲液结合缓冲液平衡 5 ~ 10个柱床体积；

3)将3 ml兔多抗血清用结合缓冲液稀释到15 ml，0.45 μm滤膜过滤上样；

4)用结合缓冲液再洗 5 ~ 10个柱床体积；

5)用洗脱缓冲液洗脱抗体，收集洗脱峰，并用中和缓冲液调节其pH至中性；

6)目的抗体洗脱后用结合缓冲液清洗5 ~ 10个柱体积平衡柱子；

7)分析洗脱下来的兔多抗。

种类 Species	亚型 Antibody Class	蛋白A Protein A	蛋白G Protein G	蛋白A蛋白G融合蛋白 Protein AG
人 Human	IgG1 IgG2 IgG3 IgG4 IgM IgD IgA Fab	-	- - -	-
小鼠 Mouse	IgG1 IgG2a IgG2b IgG3 IgM	-	-	-
大鼠 Rat	IgG1 IgG2a IgG2b IgG2c	- -
牛 Cow	IgG1 IgG2
山羊 Goat	IgG1 IgG2
马 Horse	IgG(ab) IgG(c) IgG(T)	-	- -
兔Rabbit	IgG
猪Pig	IgG
狗Dog	IgG
鸡Chicken	IgY	-	-	-

注：-表示不结合； 表示微弱结合；表示中等结合； 表示很强结合。

注意事项：

1)预填柱使用简易方便，在没有仪器设备的条件下也可以完成纯化任务；

2)样品洗脱后一般pH很低，应立刻用碱性中和缓冲液（如1 M Tris-HCl，pH 9.0）将收集到的抗体溶液中和到中性，或在收集容器中事先装5% ~ 10%、pH 7.5的缓冲液（如1 M Tris-HCl或1 M 磷酸缓冲液），以利于维持抗体的生物活性，避免抗体失活；

3)使用时保证柱子和缓冲液的温度一致，避免柱床内产生气泡，如果已经产生气泡，可以自行重装柱子；

4)多次使用后会有沉淀蛋白，强疏水性蛋白，脂蛋白，脂质体等非特异吸附凝胶上，可以用0.1 %去垢剂短时间清洗，如0.1% Triton X-100清洗2个柱体积，立即用结合缓冲液洗5 ~ 10个柱体积。也可以用70%乙醇清洗作同样清洗。

5)

推荐流速
预装柱体积（ml）	1 ml	5 ml	10 ml
流速(ml /min)	0.2	1	2