PEG8000-MgCl2溶液(40%,无菌)

简介：

聚乙二醇(Polyethylene glycolPEG)有众多品种，常见的有PEG400、PEG1500 PEG4000PEG6000PEG8000等，分子量200~600者常温下是液体，分子量在600以上者就逐渐变为半固体状，随着平均分子量的不同，性质也有差异。从无色无臭粘稠液体至蜡状固体，随着分子量的增大，其吸湿能力相应降低。其中PEG4000和PEG6000常用于促进细胞种合或原生质体融合并有助于生物体(如酵母菌)在转化中摄入DNA。

BIOISCO PEG8000-MgC12溶液(40%无菌)主要由PEG8000(CAS号25322-68-3)氯化钠等组成，其作用原理使能够改变各类细胞的膜结构，使两细胞接触点处质膜的脂类分子发生疏散和重组，两细胞接口处在双分子层质膜的相互亲和以及彼此的表面张力作用下，细胞发生融合，该试剂经严格无菌处理，仅用于科研领域，不用于临床诊断或治疗。

组成：

保存条件：

4℃保存,6个月有效。

自备材料:

1、MEM培养基、胎牛血清

2、2CO₂培养箱、离心机

3、HAT、HT、A Media Supplement

4、胰蛋白酶消化液

操作步骤(仅供参考)：

1、如果变成胶冻状，可37~60℃水浴使其变成溶液

2、如果用于杂交则按如下步骤:将杂交前体细胞以相同数量(5x104/ml)接种，以适当的培养基培养细胞，待细胞贴壁扩展至汇合成片(80%汇合率)的密度。吸干培养液加入2mlPEG8000-MgCl₂溶液(40%无菌)，轻轻转动1min使PEG8000溶液要盖所有细胞。静置1min吸干净稀释的PEG8000溶液，再用5mlMEM培养液洗涤被PEG处理的细胞，用HAT 选择培养剔除HPRT和 TK 缺陷细胞。弃上清液，用补加1xHT和1xA的完全培养液重新悬浮细胞。融合12~24h后进行异核体分析，杂交前体细胞在4~5天内发生死亡，对于大多数融合前体细胞而言，10~14天可见杂交细胞克隆。

注意事项:

1、应注意无菌操作，避免被微生物污染。

2、PEG8000-MgC12溶液(40%,无菌))较为粘稠时，可37~60℃水浴使其变成溶液。

3、体外培养的单层贴壁细胞或悬浮细胞均可做融合，但成功概率较大的是单层贴壁细胞。

4、如需HAT选择系列产品，可选择BIOISCOA Media Supplement(50)、HT MediaSupplement(50x)、HAT Media Supplement(50x)。

5、本产品仅由于科研，严禁他用。