Safe Green DNA Stain
REF: MN001
储运条件
室温,避光保存。
产品组成
组分/规格 |
MN001S-500μl |
MN001M-500μl×5 |
Safe Green DNA Stain |
500μl |
5×500μl |
产品简介
Safe Green DNA Stain是一种超安全、高灵敏、高稳定的 荧光核酸染料,浓度为10,000×,与TAE、TBE、RRB(快速电 泳缓冲液)等常用电泳缓冲溶液兼容。Safe Green DNA Stain具有较大的分子量(约1200 g/mol),无法穿透细胞膜,具有安 全无毒的优点,其灵敏度高于传统染料EB。Safe Green DNA Stain在约500nm处有最大激发波长,在250~300nm范围内的激发波长较弱,因此推荐使用配置蓝光光源的凝胶成像仪进行 成像,其次是配置紫外光源的凝胶成像仪。
Safe Green DNA Stain在在TBE缓冲液中测定的激发光谱和发射光谱
使用方法
因大分子安全核酸染料的结合可能影响DNA的迁移,因此优先推荐泡染。
1.泡染法(推荐)
①按照常规方法进行电泳。
②配制3×Safe Green DNA Stain染色液。具体方法为:将 Safe Green DNA Stain10,000×储液稀释约3,300倍到0.1 M NaCl中(例如:将15ul Safe Green DNA Stain10,000×储液和5ml 1M的NaCl加到45mlH2O中)。
注:3×Safe Green DNA Stain染色液可以大量制备,在室温下避光保存直至用完。
③将凝胶小心地放入合适的容器中,缓慢加入足量的3×染色液浸没凝胶,室温振荡染色10 ~20min h,最佳染色时间根据凝胶厚度以及琼脂糖浓度增加而略延长。
2.胶染法(用法同EB)
①制胶时加入 Safe Green DNA Stain 安全核酸染料(例如:每50 ml琼脂糖溶液中加入5ul的 Safe Green DNA Stain10,000×储液,以此比例类推)。
注1:此方法染色染料用量相对较少,500 μl的10,000× 储液大约可以配制100块50 ml的胶;
注2:Safe Green DNA Stain具有良好的热稳定性,可以在热的琼脂糖溶 液中直接添加。也可以选择将Safe Green DNA Stain10,000×储液加到琼脂糖粉末和电泳缓冲液中,再用微波炉或其他方式加热制备琼脂糖凝胶。
②按照常规方法进行电泳。
注意事项
1. 染料建议室温储存,低温易产生沉淀,若使用前出现沉淀,可 在45~50℃加热2 min,再涡旋混匀即可;
2. 优先推荐泡染法,采用泡染法进行染色时,3× Safe Green DNA Stain染色液可重复使用3次左右;
3. 若使用胶染法进行染色,建议电泳时使用较低电压,并适当延长电泳时间;减少DNA上样量(介于2~15 ng之间)以免条带弥散或出现“笑脸”;降低凝胶浓度,提高大片段的分辨率。