PEG1500溶液(50%无菌)

简介：

聚乙二醇(Polyethylene glycol,PEG)有众多品种，常见的有PEG400、PEG1500、 PEG4000、PEG6000PEG8000等，聚乙二醇系列产品无毒、无刺激性，味微苦，具有良好的水溶性，并与许多有机物组份有良好的相溶性，具有优良的润滑性、保湿性、分散性、粘接剂、抗静电剂及柔软剂等，分子量200~600者常温下是液体，分子量在600以上者就逐渐变为半固体状，随着平均分子量的不同，性质也有差异。从无色无臭粘稠液体至蜡状固体。随着分子量的增大，其吸湿能力相应降低。其中 PEG4000 和 PEG6000 常用于促进细胞融合或原生质体融合并有助于生物体(如酵母菌)在转化中摄入DNA。

PEG1500溶液(50%无菌)可用作融合剂，以获得生产单克隆抗体的杂交瘤细胞，诱导细胞杂交，该试剂同sigmaP7181产品，经严格无菌处理，仅用于科研领域，不用于临床诊断或治疗。

组成：

保存条件：

4℃保存,6个月有效。

操作步骤(仅供参考)：

1、如果变成胶冻状，可37~60℃水浴使其变成溶液。

2、单层贴壁细胞:将杂交前体细胞以相同数量(5×10⁴/ml)接种，以适当的培养基培养细胞，待细胞贴壁扩展至汇合成片(80%汇合率)的密度。吸干培养液，加入PEG1500溶液(50%无菌)轻轻转动1min使PEG1500溶液覆盖所有细胞。静置1min，加入5ml完全MEM培养液以稀释PEG1500溶液，弃上清液用补加1xHT和1×A的完全培养液重新悬浮细胞。融合12~24h后进行异核体分析，杂交前体细胞在4~5天内发生死亡，对于大多数融合前体细胞而言，10~14天可见杂交细胞克隆。

3、悬浮细胞:将两种不同亲体的细胞各1ml(约为1×10⁷)混匀，离心以沉淀杂交前体细胞，弃上清液，使之剩余约1ml手指轻弹管底或手摇离心管使两种细胞混匀并重新悬浮。1000g离心，弃上清液，加入完全MEM培养液以稀释PEG1500溶液，吸干净稀释的PEG1500溶液。用无血清MEM培养液，手摇离心管重悬细胞(不要破坏细胞)，1000g离心5min，弃上清液，重复1次该步骤。加入含有20%的胎牛血清的HAT选择培养液，混匀，将细胞悬液用培养液稀释至5x10⁴/ml接种于96孔板(每孔0.1ml)或其他器皿中，37℃5%CO₂孵育过夜后选出融合细胞。

注意事项:

1、应注意无菌操作，避免被微生物污染。

2、PEG1500溶液较为粘稠时，可37~60℃水浴使其变成溶液。

3、体外培养的单层贴壁细胞或悬浮细胞均可做融合，但成功概率较大的是单层贴壁细胞。

4、如需HAT选择系列产品，可选择BIOISCO A Media Supplement(50x)、HT MediaSupplement(50x)、HAT Media Supplement(50x)。

5、本产品仅由于科研，严禁他用。