柠檬酸盐脱钙液

简介：

在组织切片过程中,一些组织内含有骨质或钙化灶时,含钙的组织不宜直接用石蜡包埋切片。这是因为钙和石蜡之间的密度不同,较难切出完整的切片。对含钙组织最好固定之后,再进行脱钙或二者同时进行。然后进行下游操作如脱水、透明、浸蜡、包埋、切片。用于脱钙的试剂很多,脱钙剂包括有机酸、无机酸、乙二胺四乙酸(EDTA)以及电解法脱钙。

BIOISCO柠檬酸盐脱钙液是缓冲脱钙液,属于缓慢脱钙液,主要由柠檬酸、柠檬酸盐、硫酸锌等组成, pH值约为4.5。其优点是:经柠檬酸盐脱钙液的组织染色结果好;对组织的结构损害小。其缺点是:脱钙速度很慢,不适合常规标本脱钙使用;脱钙后组织会稍微变硬。该试剂仅用于科研领域,不宜用于临床诊断或其他用途。

组成：

保存条件：

RT保存，12个月有效。

自备材料:

1、 PBS

2、 蒸馏水

3、 加热装置或微波炉

操作步骤(仅供参考)：

1、 骨组织脱钙时,取材不易过厚。

2、 组织固定后,用PBS清洗。

3、 组织用蒸馏水洗清洗。

4、 组织转移至柠檬酸盐脱钙液中,脱钙15～30天或更长时间。如果想加快脱钙速度,可以置于37?进行脱钙。如果必要,更换新的柠檬酸盐脱钙液继续脱钙,多数组织脱钙2周～3个月即可,每周更换一次直至终点。亦可采用微波快速脱钙法:微波炉设在200W左右的档位,每次加热5min,依据组织厚度和密度重复3～5min,中间间隔3～5min。

5、 用蒸馏水冲洗数次。

6、 常规脱水、包埋。

注意事项:

1、厚度5mm的骨组织块脱钙时间一般脱钙10~30天即可,大多数在14～60天即可。 2、 适当加温能加快脱钙的速度,一般不应超过37～40℃,温度过高容易使骨组织造成松散解体,尤其不可大于60℃。

3、脱钙应彻底,防止脱钙不足或过度。脱钙程度应控制在不影响组织切片的同时尽量缩短脱钙时间,以免脱钙过长引起组织损害。

4、脱钙用具避免使用金属容器,尽量使用玻璃容器。

5、骨组织脱钙应先固定后脱钙或脱钙固定同时进行,不应先脱钙后固定,以便减少组织的损伤程度。

6、每隔一段时间检测一次脱钙程度,脱钙过度会增加组织的损伤程度,影响染色结果。

7、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

8、本产品仅用于科研，严禁他用。

附录:

脱钙终点的测定(物理法):采用针刺、手掐、钳夹等方法,当骨组织变软或针刺时没有阻力感即可终止脱钙。物理检测法会对组织结构有一定的损害, 尽量避免用力过大或反复检测。