Agarose

简介：

琼脂糖（Agarose）作为凝胶电泳常用支持物，其纯度会直接影响DNA的分辨能力及电泳结果的清晰度。伊势久生物高纯度的琼脂糖，通常配置成浓度为0.5～2%的琼脂糖凝胶，用于分离、鉴定核酸，如DNA鉴定、DNA限制性内切核酸酶图谱制作等。配合核酸荧光染料，使用激光凝胶扫描仪，即可观察电泳结束后的核酸条带。

组成：

有效期：

3年

使用方法：

1.依据目的核酸片段大小及电泳缓冲液类型，确定所需琼脂糖浓度。

琼脂糖浓度	理想线形DNA分辨范围（bp）
	1× TAE	1× TBE
0.6%	1200~15000	1200~12000
0.8%	1000~10000	1000~12000
1.0%	200~10000	100~10000
1.2%	100~8000	100~5000
1.5%	100~5000	50~3000
2.0%	50~3000	50~3000
2.5%	50~3000	50~2000

2.琼脂糖凝胶制备（以水平电泳琼脂糖凝胶制备为例）：

① 根据制胶量及凝胶浓度，量取一定量的电泳缓冲液（TAE或TBE），倒入三角锥形瓶中。

注意：制胶缓冲液和电泳缓冲液需一致。

② 准确称量琼脂糖，小心加入上述三角锥形瓶中。在锥形瓶的瓶口盖上牛皮纸，置于微波炉中加热溶解。加热至溶液沸腾后，请戴上防热手套，小心晃动锥形瓶，如此重复数次，直至琼脂糖完全溶解。

注意：琼脂糖溶解过程采用多次短暂沸腾的方法,避免溶液过热暴沸。保证琼脂糖充分完全溶解，以免造成电泳图像模糊不清。

③ 在充分溶解的琼脂糖里加入核酸染料。

④ 将琼脂糖溶液倒入制胶模中，然后在适当位置处插上梳子。凝胶厚度一般在3~5mm之间。

⑤ 室温下待胶凝固（大约30分钟~1小时），置于电泳槽中进行电泳。

质量控制

1.凝胶强度（1%凝胶）： 1200g/cm2；

2.电渗（EEO）：0.15；

3.硫化物：≤0.15%；

4.凝胶温度（1.5%凝胶）：35~37℃；

5.熔胶温度（1.5%凝胶）：87~89℃；

6.水分：≤10%；

7.核酸酶不得检出。

注意事项

1. 熔胶可能会引起暴沸，需注意防止烫伤。

2. 若使用具有致癌性的荧光染料进行凝胶核酸染色(如溴化乙锭等),请佩戴手套。

3. 配置好的凝胶如不立即使用，请用保鲜膜将凝胶包好，置于4℃一般可保存2~5天。