上海舟福科贸有限公司
土壤木质素过氧化物酶(Soil lignin peroxidase,S-Lip)试剂盒说明书
分光光度法50管/24样
正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定
测定意义:
木质素过氧化物酶(EC1.11.1.14)是一种含亚铁血红素的过氧化物酶,属于木质素降解酶系,在木质素生物降解、造纸工业、纺织工业、芳香化合物转化与降解及环境污染控制等方面具有较大的应用潜力。
测定原理:
木质素过氧化物酶氧化藜芦醇生成藜芦醛,在310nm处有特征吸收峰。
试剂组成和配制 :
产品名称 |
SSQ066-50T/24S |
Storage |
试剂一:液体 |
25ml |
4℃ |
试剂二:液体 |
25ml |
4℃避光 |
试剂三:液体 |
20ml |
4℃ |
说明书 |
一份 |
自备仪器和用品:
天平、低温离心机、紫外分光光度计、1 ml石英比色皿、震荡仪、甲苯。
样品处理:
新鲜土样风干,过30-50目筛。
测定步骤:
1、加样表(在2ml EP管中依次加入下列试剂):
对照管 |
测定管 |
|
土样(g) |
0.1 |
0.1 |
甲苯(μl) |
50 |
50 |
25℃静置15min |
||
试剂一(μl) |
750 |
|
蒸馏水(μl) |
750 |
|
试剂二(μl) |
450 |
450 |
试剂三(μl) |
300 |
300 |
30℃震荡反应3h,冰浴5min,12000g,4℃离心10min,取上清800μl,于1ml石英比色皿,测定310nm处吸光值,分别记为A对照和A测定,△A=A测定- A对照 |
酶活计算公式:
酶活性定义:每克土壤每天氧化1nmol藜芦醇所需的酶量为一个酶活力单位。
S-LiP活性(nmol/d/g 土样)= ×V反总÷W÷T= 1290×△A÷W
ε:藜芦醛摩尔消光系数:9300L/mol/cm;d:比色皿光径,1cm;V反总:反应总体积,1.5ml; W:样本质量,g;T:反应时间,3h。