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土壤锰过氧化物酶（Soil manganese peroxidase，S-Mnp）试剂盒说明书
分光光度法 50管/24样
正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定
测定意义：
锰过氧化物酶（EC1.11.1.13）是一种含亚铁血红素的过氧化物酶，主要存在于担子菌中，属于木质素降解酶系，能有效的降解木质素及废水和土壤中比较难降解的氯化物，叠氮化合物、DTT，多环芳烃等。
测定原理：
锰过氧化物酶在Mn2 存在的条件下，将愈创木酚氧化为四邻甲氧基连酚，在465nm有特征吸收峰。
试剂组成和配制：
产品名称 |
SSQ064-50T/24S |
Storage |
试剂一：液体 |
30ml |
4℃ |
试剂二：液体 |
5ml |
4℃ |
试剂三：液体 |
10ml |
4℃避光 |
试剂四：液体 |
5ml |
4℃ |
说明书 |
一份 |
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自备仪器和用品：
天平、低温离心机、可见分光光度计、1 ml玻璃比色皿、震荡仪、甲苯。
样品处理：
新鲜土样风干，过30-50目筛。
测定操作：
对照管 |
测定管 |
|
土样（g） |
0.1 |
0.1 |
甲苯（μl） |
50 |
50 |
25℃，静置15min |
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试剂一（μl） |
700 |
600 |
试剂二（μl） |
100 |
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试剂三（μl） |
200 |
200 |
试剂四（μl） |
100 |
100 |
充分混匀，于30℃震荡反应3h，于10000rpm，4℃离心10min，取800μl于1ml玻璃比色皿，测定465nm处吸光值，记为A对照管和A测定管，△A=A测定管-A对照管 |
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酶活计算公式：
（酶活性定义：每克土壤每分钟氧化1nmol愈创木酚所需的酶量为一个酶活力单位。
S-MnP活性（nmol/min/g 土样）= ×V反总÷W÷T= 8.3×△A÷W
ε：愈创木酚摩尔消光系数：12100L/mol/cm；d：比色皿光径，1cm；V反总：反应总体积，1ml；W：样本质量，g；T：反应时间，10min
