土壤无机磷(soil inorganic phosphorus,S-PHOS)含量试剂盒说明书
分光光度法 50管/48样
正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定
测定意义:
磷是植物必需大量元素。植物主要通过根系从土壤中获取磷元素。土壤磷包括有机磷和无机磷。土壤有机磷经过矿化分解而转化为无机磷,才能进一步被植物吸收利用。
测定原理:
从土壤中提取无机磷,在酸性环境中,通过钼蓝法定磷,即可计算出无机磷含量。
试剂组成和配制:
产品名称 |
SSQ052-50T/48S |
Storage |
试剂一:液体 |
1瓶 |
4℃ |
试剂二:液体 |
1瓶 |
4℃ |
试剂三:粉剂 |
1瓶 |
4℃避光 |
标准品:液体 |
1支 |
4℃ |
说明书 |
一份 |
试剂一:液体×1瓶,4℃保存。临用前用蒸馏水稀释10倍后再用;
试剂三:粉剂×1瓶, 4℃避光保存。临用前配制,加入20 ml蒸馏水,充分溶解后加入10 ml试剂二,混匀;
标准品:液体×1支,20 μmol/L无机磷标准液,4℃保存。
自备仪器和用品:
可见分光光度计、台式离心机、可调式水浴锅,分析天平、可调式移液器、1ml玻璃比色皿、蒸馏水和100目筛子。
土壤无机磷提取:
取10 ml离心管,加入精确称取的100目筛子过筛的风干土样约0.1g,加入10 ml提取液,震荡混匀,然后置于40℃水浴浸提1 h,8000g,25℃,离心10min,取上清液,待测。
测定步骤:
1. 分光光度计预热30 min,调节波长到660 nm,蒸馏水调零。
2.打开水浴锅,调节温度到40℃。
3. 空白管:取EP管,依次加入500μl蒸馏水,500μl试剂三,混匀后置于40℃水浴保温10min,室温冷却10 min后于660 nm测定吸光度,记为A空白管。
4. 标准管:取EP管,依次加入50μl标准液,450μl蒸馏水,500μl试剂三,混匀后置于40℃水浴保温10min,室温冷却10 min后于660 nm测定吸光度,记为A标准管。
5. 测定管:取EP管,依次加入50μl上清液,450μl蒸馏水,500μl试剂三,混匀后置于40℃水浴保温10min,室温冷却10 min后于660 nm测定吸光度,记为A测定管。
需在40min内完成比色。
土壤无机磷含量计算公式:
S-PHOS(nmol/d /g干重)= [C标准液×(A测定管-A空白管)÷(A标准管-A空白管)]×V总÷W
= 200×(A测定管-A空白管)÷(A标准管-A空白管)÷W
C标准液:20 μ mol/L;V总:总上清液体积,10 ml=0.01 L;W:土壤样品质量,g。
注意事项:
1、空白管和标准管只需测定一次。
2、试剂三需临用前配制,限当天使用。试剂三配制过程中,可能会产生黑色固体,其不影响结果,注意吸取时不要将黑色固体吸入。
3、40min内完成比色。