植物总酚(Total Phenols,TP)试剂盒说明书
分光光度法 50管/24样
正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定
测定意义:
植物酚类物质具有清除自由基,抗氧化抗衰老的作用,具有较高的营养价值和医疗保健作用而广泛应用于化妆品、食品、医药等领域。
测定原理:
在碱性条件下,酚类物质将钨钼酸还原,产生蓝色化合物,在760nm处有特征吸收峰,测760nm处的吸光值,即可得样品总酚含量。
组成:
产品名称 |
AO013-50T/24S |
Storage |
提取液 |
60%乙醇,自备 |
4℃ |
试剂一:液体 |
6ml |
4℃ |
试剂二:液体 |
15ml |
4℃ |
说明书 |
一份 |
自备仪器和用品:
天平、烘箱、粉碎仪、筛子、超声破碎仪、60%乙醇、离心机、可见分光光度计、1 ml玻璃比色皿、蒸馏水。
总酚提取:
将样本烘干至恒重,粉碎,过40目筛之后,称取约0.1g,加入2.5ml提取液,60℃振荡提取2h。10000g,25℃,离心10min,取上清,用提取液定容至2.5ml,待测。
测定操作表:
对照管 |
测定管 |
|
样本待测液(μl) |
50 |
50 |
试剂一(μl) |
250 |
|
混匀,25℃静置2min |
||
试剂二(μl) |
250 |
250 |
H2O(μl) |
700 |
450 |
混匀,25℃静置10 min,对照管调零,1ml比色皿,测定A760。 |
总酚含量计算公式:
标准曲线:y = 5.615x 0.0012,R2 = 0.9994
总酚含量(mg/g 干重)=(A760-0.0012)÷5.615×V样÷(V样÷V样总×W)
= 0.445×(A760–0.0012)÷W
V样总:加入提取液体积,2.5ml; V样:反应中样品体积,0.05ml;W:样品质量,g
注意事项:
1. 吸光值大于2,样品适当稀释再测定,注意计算公式里乘以稀释倍数。
2. 试剂一对皮肤有一定的刺激性,请操作时做好防护措施。
3. 最低检出限为2.4μg/g。