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伊势久生物 铜蓝蛋白 Cp 检测试剂盒 微量法100T/48S 科研专用

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上海舟福科贸有限公司
产品详情


铜蓝蛋白(CeruloplasminCp)测定试剂盒说明书

微量法100T/48S

正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定

测定意义:

铜蓝蛋白是血浆的含铜蛋白,有运输铜的功能,同时具有氧化酶的活性,是细胞外液重要的抗氧化剂。

测定原理:

铜蓝蛋白催化3,3’,5,5’-四甲基联苯胺生成蓝色产物,在645nm处有特征吸收峰,依此可得铜蓝蛋白活性。

组成:

产品名称

AO010-100T/48S

Storage

试剂一:液体

10ml

4℃

试剂液体

7ml

4℃

试剂液体

15ml

4℃避光

说明书

一份

试剂三:液体15ml×1瓶,4避光保存。(使用前37预热)

自备仪器和用品:

天平、可见分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96孔板和蒸馏水。

测定操作表

1、分光光度计/酶标仪预热30min以上,调节波长至645nm,蒸馏水调零。

2、操作表

空白管

测定管

样品(μl

30

30

试剂一(μl

90

90

试剂二(μl

60

混匀,37预热5min

试剂三(μl

120

120

混匀,37反应30min

试剂二(μl

60

混匀,25室温放置5min,取200μl于微量石英比色皿/96孔板中测定645nm处吸光值。

ΔA=A测定-A空白。

计算公式:

a.用微量石英比色皿测定的计算公式如下

1、按体积计算

酶活定义:37条件下每分钟每毫升样品与底物作用吸光度升高0.01为一个酶活单位。

Cp活力U/ml=ΔA×V÷0.01÷V÷T = 33.33×ΔA

2、按鲜重计算

单位定义:37℃条件下,每分钟每克样品与底物作用吸光值升高0.01为一个酶活单位。

Cp活力U/g鲜重=ΔA×V÷0.01÷W×V÷V样总)÷T = 33.33×ΔA÷W

3、按蛋白浓度计算

单位定义:37℃条件下,每分钟每毫克蛋白样品与底物作用吸光值升高0.01为一个酶活单位。

Cp活力U/ mg prot=ΔA×V÷0.01÷Cpr×V样)÷T = 33.33×ΔA÷Cpr

V样:0.03 mlV总:0.3mlT:反应时间,30minV样总:加入提取液体积,1mlCpr:样本蛋白质浓度,mg/mlW:样质量,g

b.用微量石英比色皿测定的计算公式如下

1、按体积计算

酶活定义:37条件下每分钟每毫升样品与底物作用吸光度升高0.005为一个酶活单位。

Cp活力U/ml=ΔA×V÷0.005÷V÷T = 66.66×ΔA

2、按鲜重计算

单位定义:37℃条件下,每分钟每克样品与底物作用吸光值升高0.005为一个酶活单位。

Cp活力U/g鲜重=ΔA×V÷0.005÷W×V÷V样总)÷T = 66.66×ΔA÷W

3、按蛋白浓度计算

单位定义:37℃条件下,每分钟每毫克蛋白样品与底物作用吸光值升高0.005为一个酶活单位。

Cp活力U/ mg prot=ΔA×V÷0.005÷Cpr×V样)÷T = 66.66×ΔA÷Cpr

V样:0.03 mlV总:0.3mlT:反应时间,30minV样总:加入提取液体积,1mlCpr:样本蛋白质浓度,mg/mlW:样质量,g

注意事项:

试剂二和试剂三有一定的毒性和刺激性,请操作时做好防护措施。

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