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生化试剂木质素(Lignin)含量检测试剂盒(微量法100T/96S)

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上海跃腾生物技术有限公司
产品详情


木质素(Lignin)含量试剂盒说明书

微量法 100/96

正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定

测定意义:

木质素是构成植物细胞壁的成分之一,是由聚合的芳香醇构成的一类物质,存在于木质组织中,主要作用是通过形成交织网来硬化细胞壁。木质素主要位于纤维素纤维之间,起抗压作用。

测定原理:

木质素中的酚羟基发生乙酰化后在280nm处有特征吸收峰,280nm的吸光值高低与木质素含量正相关。

试剂组成和配制:

产品名称

OT035-100T/96S

Storage

试剂一:液体

50ml

4℃

试剂二:液体

50ml

4℃

试剂三:液体

100ml

4℃

说明书

一份

自备仪器和用品:

天平、40目筛,玻璃试管、烧杯、离心机,恒温水浴锅、封口膜、烘箱、紫外分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96孔板(UV)、高氯酸,浓硫酸。

样品处理:

样品80℃烘干至恒重,粉碎,过40目筛,称取约2mg(记为W)于10ml玻璃试管中(务必用玻璃试管,不可用Ep管)。

测定步骤:

空白管

测定管

样本(mg

2

试剂一(μl

500

500

高氯酸(μl

20

20

10ml玻璃试管中,用封口膜密封,充分混匀,80℃水浴40min,每隔10min震荡一次,然后自然冷却

试剂二(μl

500

500

充分混匀

上清(μl

20

20

试剂三(μl

980(参照注意事项四)

980(参照注意事项四)

200μl于微量石英比色皿/96孔板,测定280nm处吸光值A。分别记为A空白管和A测定管,ΔA=A测定管-A空白管

计算公式

标准曲线:y = 0.0347x+0.0068R2=0.9889

Ligninmg/g干重)= (ΔA-0.0068)÷0.0347×V反总×10-3÷W×T=0.0294×(ΔA-0.0068)÷0.002×50

V反总:反应总体积:1.02mlW:样本质量,gT:稀释倍数

注意事项

1、试剂一有毒性,请操作时做好防护措施,加热前必须用封口膜密封,以防气体溢出。

2、加热过程中有剧烈反应,震荡时轻摇,以免压力过大喷出造成人身伤害。

3、试剂三具有强刺激性,建议操作过程全部在通风橱子操作。

4、取上清加试剂三步骤根据自己样品乙酰化程度,试剂三的用量可调整,吸光值在0.1-0.8之间即可,并在公式中参与计算。

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