土壤几丁质酶（Soil Chitinase，S-Chitinase）试剂盒说明书

分光光度法50管/24样

正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定

测定意义：

几丁质主要存在于虾、蟹、昆虫等甲壳类动物的外壳与软体动物的器官(例如乌贼的软骨)，以及真菌类的细胞壁中，而几丁质酶(EC 3.2.1.14)可催化几丁质水解，具有抵御真菌侵染的作用，成为抗真菌病害的研究热点。

测定原理：

几丁质酶水解几丁质产生N-乙酰氨基葡萄糖，进一步与对二甲氨基苯甲醛产生红色化合物，在585nm处有特征吸收峰，吸光值增加速率反映了几丁质酶的活性。

试剂组成和配制：

自备仪器和用品：

天平、水浴锅、离心机、震荡仪、可见分光光度计、1 ml玻璃比色皿，甲苯、蒸馏水。

样品处理：

新鲜土样风干，过30-50目筛。

测定操作表：

计算公式：

标准曲线：y=5.2714x-0.0007，R²=0.9989；x为标准品浓度（mg/ml），y为吸光值ΔA。

酶活性定义：37℃条件下，每克土壤每天分解几丁质产生1μg N-乙酰氨基葡萄糖的酶量为一个酶活性单位。

土壤几丁质酶活性（μg/d/g 土样）=（ΔA 0.0007）÷5.2714×V反总÷W÷T×1000= 598×（ΔA 0.0007）

V反总：反应体系总体积，0.63ml；W：样本质量，0.2g；T：反应时间，1d；1000：1mg/ml=1000μg/ml

注意事项：

试剂一充分混匀后再使用。