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伊势久生物 羟自由基清除能力测定试剂盒(分光光度法50T/48S) 微量法100T/96S 科研专用

¥ 350

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上海跃腾生物技术有限公司
产品详情

羟自由基能力测定试剂盒说明书

分光光度法 50/48

正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定

测定意义:

羟自由基作用于体内蛋白质、核酸、脂类等生物分子,造成细胞结构和功能受损,进而导致体内代谢紊乱引起疾病。羟自由基能力是样品抗氧化能力的重要指标之一,在抗氧化类保健品和药品研究中得到广泛应用。

测定原理:

H2O2/ Fe2 通过Fenton反应产生羟自由基,将邻二氮菲- Fe2 水溶液中Fe2 氧化为Fe3 ,导致536nm吸光度下降,样品对536nm吸光度下降速率的抑制程度,反映了样品羟自由基的能力。

组成:

产品名称

AO007-50T/48S

Storage

提取液

50ml

4℃

试剂一:液体

16ml

4℃避光

试剂二:液体

8ml

4℃避光

试剂液体

16ml

4℃

试剂液体

9ml

4℃

说明书

一份

自备仪器和用品:

恒温水浴锅、可见分光光度计、1 ml玻璃比色皿和蒸馏水。

样品的制备:

1.组织:按照组织质量(g):提取液体积(ml)15~10的比例(建议称取约0.1g组织,加入1ml提取液)进行冰浴匀浆,然后10000g4℃离心10min,取上清,置冰上待测。

2.血清、果汁等液体样品可直接测定。

3.提取物(或者)可配制成一定浓度,如5 mg/ml

测定操作表

1、分光光度计预热30min,调节波长至536nm,蒸馏水调零。

2、工作液配制:使用之前按照每管试剂一:试剂二:试剂三=300:150:300μl的比例配制,用多少配多少,混匀。

3、在EP管中加入如下试剂

空白管

对照管

测定管

工作液μl

750

750

750

混匀,防止局部颜色过浓

样品μl

150

试剂四μl

150

150

H2Oμl

300

150

混匀、37℃保温60min8000g 25℃离心5min吸取1ml1ml玻璃比色皿中测定536nm吸光值空白管、对照管和测定管的吸光值分别记为A空、A对和A测。

注意:空白管和对照管只需测定一次。

计算公式

羟自由基率 D% =A-A对)÷A-A对)×

A空、A对、A测:空白管、对照管和测定管的吸光值。

注意事项

为了比较不同样品羟自由基能力,对于同一批样品必须加入等量的样品,血清、组织匀浆、果汁等液体样品加入同样体积,提取物(或者)配制成同样浓度。

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