Trap 染色试剂盒

产品简介：

酸性磷酸酶(acid phosphatase，ACP) 遍布各种组织，分布极为广泛，因为主要存在于细胞的溶酶体内，所以通常被当作溶酶体标志酶。而溶酶体外的酸性磷酸酶存在于胞质内和内质网。不同种类的动物体内所含的酸性磷酸酶也不同，酸性磷酸酶的适宜pH范围在4.5～5.5之间。白血病人脾脏和正常人肺泡巨噬细胞存在的的抗酒石酸酸性磷酸酶(Tartrate-resistnt acid phosphatase，TRAP)并不是释放入血液，而是在细胞滤泡中。血液中绝大多数的TRAP来源于破骨细胞，因此可以通过测量血液中的TRAP了解破骨细胞的功能状态。

BIOISCO抗酒石酸酸性磷酸酶染色液将萘酚AS-BI作为底物，在酸性pH条件下被酸性磷酸酶水解释放出萘酚和磷酸，萘酚可以偶联重氮盐从而生成定位于细胞质中的有色产物，如果细胞内的ACP有抗酒石酸的活性，则呈阳性反应。该染色液不仅可用于细胞涂片、新鲜血涂片，还可以用于石蜡切片、冰冻切片。

组成：

产品名称		SS001-50ml+11ml+10ml	Storage
试剂(A): TRAP 固定液		50 ml	4 ℃ 避光
试剂(B): TRAP 孵育液	B1: AS-BI Buffer	1 ml	4 ℃ 避光
	B2: 显色液	2×0.5 ml	4 ℃ 避光
	B3: TRAP Buffer	9 ml	4℃ 避光
临用前，将 B2 的显色液Ⅰ和显色液Ⅱ二支等比例混合均匀，再按B1:B2:B3=1:1:9 混合，即为 TRAP 孵育液，即配即用。
试剂(C): 苏木素染色液		10 ml	4℃ 避光
说明书		一份

储存条件：

4℃避光保存，6个月有效。

自备材料：

1、 恒温箱、蒸馏水。

2、 载玻片、推玻片。

光学显微镜。

操作步骤（仅供参考）：

(一)血液、细胞涂片：

1、 推片：在载坡片上放置新鲜血液或骨髓涂片，于载玻片处将推玻片保持30度，置于细胞滴液或血液的正前方，往后稍微移动与血液或细胞滴液接触使后者沿推片下缘散开，此时沿载玻片平面匀速平稳向前滑动直至铺满血膜为止。

2、 自然晾干后使用TRAP固定液固定。

3、 水洗，略微晾干(不易过分干燥)。

(二)冰冻切片：

1、 冰冻切片回温后放于水中浸泡。

2、 自然晾干后使用TRAP固定液固定。

3、 水洗，略微晾干(不易过分干燥)。

4、 切片放入TRAP孵育液，置于温箱，避光浸染，水洗。

(三)石蜡切片：

1、 石蜡切片脱蜡，重复此步骤一次。

2、 无水乙醇，90 %乙醇和70 %乙醇。

3、 水洗。

4、 自然晾干后使用TRAP固定液固定。

5、 水洗，略微晾干(不易过分干燥)。

染色结果：

临床意义：

1、 毛细胞白血病的毛细胞ACP染色后呈现出中度阳性或强阳性，且酒石酸无法抑制，此时其他细胞均呈现极弱阳性或阴性。

原粒细胞对ACP反应不一，急性白血病幼单核细胞ACP染色呈现阳性，原淋巴细胞呈现弱阳性。

3、 T淋巴细胞ACP染色呈现阳性，颗粒粗大、分布密集。B淋巴细胞呈现阴性或颗粒细小的弱阳性。

4、 戈谢细胞呈现强阳性，尼曼-皮克细胞呈现阴性或弱阳性。

注意事项：

1、 TRAP孵育液非常容易失效，本法适合使用皮肤穿刺血涂片，处理晾干后的样本需及时染色。

2、 冰冻切片染色时，应当减少切片在室温下所暴露的时间。

3、 为避免酶的活性受到影响，实验所用样本应新鲜，取材后需立即处理。

4、 需在4 ℃冰箱内进行组织固定，固定时间不宜超过24 h，否则酶的活性会出现减弱或消失。

5、 组织在石蜡包埋时，温度不宜高于56℃。为防止酶活性减弱或消失。应使用熔点为52～54 ℃的石蜡进行浸蜡，浸蜡时间要短。

6、 应选用AR级以上的二甲苯以避免不纯的二甲苯导致的黑色沉淀。

7、 为了您的和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

8、 本产品仅供科研使用，严禁它用。