分步水解法提取〔6〕分步水解提取法是将碱和酶结合起来分步进行提取。王亚林等先用碱溶法提取部分蛋白质，然后采用碱性蛋白酶对残渣轻微水解，以提高蛋白质溶解性，进行蛋白质二次提取，提取效果较好。迟明梅等采用酶碱两步法提取大米蛋白，先用α–淀粉酶部分酶解淀粉，使淀粉和大米蛋白结合疏松化，然后对酶解产物进行碱溶酸沉提取蛋白质，所得大米蛋白纯度达85.1%；但分步水解法分界点不易控制，尚需进一步研究。

3.4新的提取方法〔3〕国外研究发现，利用声波、冻结―融化、高压和高速度均质等物理处理与酶处理相结合提取米糠中蛋白效果较好。Issara Sereewatthanawut等开展利用亚临界水（subcriticalwater）水解法从脱脂米糠中提取大米蛋白和氨基酸研究。结果表明，在温度为200℃、反应时间为30 min亚临界水状态下，亚临界水能有效从脱脂米糠中提取大米蛋白质和氨基酸，其蛋白质得

率高于传统碱法水解提取。同时，随温度升高，蛋白质提取率也提高，这是因高温状态下蛋白质溶解度增加。其主要原因是温度升高，电离常数增加，在水合离子和氢氧离子存在条件下，肽键断裂形成小分子解性蛋白质和氨基酸。总之，从米糠中提取大米蛋白是目前大米综合利用方向，在此基础上开发高附加值大米蛋白粉和活性肽等产品大有可为。