甲基绿染色液(0.1%)
简介:
甲基绿,化学式为C27H35BrClN3·ZnCl2,分子量为608.78,是具有金属光泽的绿色微结晶或亮绿色粉末。溶于水,显蓝绿色。稍溶于乙醇,不溶于戊醇。其是一种碱性染料,它易与聚合程度高的DNA结合呈现绿色,又称双绿SF。
甲基绿染色液(0.1%)在组织或细胞染色中对细胞核进行染色,常用于鉴定DNA,细胞核中的DNA遇甲基绿会被染成蓝绿色,亦可用于免疫荧光染色或免疫组化染色。本品仅用于科研实验,不可做他用。
组成:
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Storage |
甲基绿染色液(0.1%) |
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RT 避光 |
说明书 |
一份 |
储存条件:
常温避光保存,一年有效
自备材料:
1、4%多聚甲醛
2、蒸馏水
3、系列乙醇
操作步骤(仅供参考):
1、样品处理
a)对于石蜡切片:
二甲苯中脱蜡。
更换新鲜的二甲苯,再脱蜡5~10 min。
无水乙醇5 min。
乙醇2 min。
乙醇2 min。
蒸馏水2 min。
b)对于冰冻切片:
蒸馏水2 min。
c)对于培养细胞:
用多聚甲醛固定10 min以上。
蒸馏水洗涤2 min。
更换新鲜的蒸馏水,再洗涤2 min。
2、甲基绿染色
a) 对于上述处理好的样本,用Methyl Green Stain(1%)染色5~10 min。
b)用蒸馏水冲洗2次,此时样本呈蓝色。
c)乙醇处理5 s。
d)用乙醇洗涤2次,直接观察或按下列组织切片操作步骤进行。
3、组织切片染色
a)乙醇脱水2 min。
b)更换新鲜的乙醇再脱水2 min。
c)二甲苯透明5 min。
d)二甲苯透明5 min。
e)中性树胶或其它封片剂封片。
f)显微镜下观察,细胞核呈绿色或蓝绿色。
4、荧光染色
a)如果进行免疫荧光染色,在甲基绿染色液染色后,乙醇洗涤2 次,每次2 min。
b)乙醇脱水2 min。
c)PBS或生理盐水或TBS等用于免疫染色或荧光染料染色的溶液浸泡5 min。
d)进行免疫荧光染色或其它荧光染料的染色。
染色结果:
细胞核 |
绿色或蓝绿色 |
注意事项:
1、 使用本染液时建议先取1~2个样品做预实验。
2、 甲基绿染色可以根据染色结果和要求调整时间。
3、 为了您的和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。