甲基绿-派洛宁染色液

简介：

甲基绿-派洛宁(methyl green-pyronin)为碱性染料，它分别能与细胞内的DNA、RNA结合呈现不同颜色。当甲基绿与派洛宁作为混合染料时，甲基绿与染色质中DNA选择性结合显示绿色或蓝色；派洛宁与核仁、细胞质中的RNA选择性结合显示红色。其原因可能是两种染料的混合染液中有竞争作用，同时两种核酸分子都是多聚体，而其聚合程度有所不同。甲基绿易与聚合程度高的DNA结合呈现绿色。而派洛宁则与聚合程度较低的RNA结合呈现红色（但解聚的DNA也能和派洛宁结合呈现红色）。即RNA对派洛宁亲和力大，被染成红色，而DNA对甲基绿亲和力大，被染成绿色。

BIOISCO甲基绿-派洛宁染色液可以和免疫荧光染色或免疫组化染色配合使用。一方面可以在本甲基绿-派洛宁染色液染色后进行免疫荧光染色或其它染料的染色，另一方面也可以在免疫组化染色后再进行甲基绿-派洛宁复染。该产品仅适用于科研实验，不可做他用。

组成：

储存条件：

常温避光保存，一年有效

使用说明

取A液和B液混合均匀后即甲基绿-派洛宁染色液工作液。应该注意的是该试剂应现配现用。根据自己的用量可以适当配制相应的体积。

操作步骤(仅供参考)：

(一)石蜡切片染色

1、组织放入Carnoy固定液或10%中性福尔马林固定。

2、切片5 um，常规脱蜡至水，蒸馏水稍洗。

3、入甲基绿-派洛宁染色液室温浸染。

4、取出切片，用滤纸稍微吸干切片周围染色液。

5、用丁三醇(也可用丙酮或正戊醇)冲洗3次。

6、二甲苯透明，中性树胶封固。

(二)冰冻切片染色

1、蒸馏水冲洗2 min。

2、切片入甲基绿-派洛宁染色液室温浸染。

3、用蒸馏水冲洗2次，此时样本呈蓝色。

4、余下步骤同石蜡切片染色。

(三)细胞染色

1、用4%多聚甲醛固定10 min以上。

2、蒸馏水洗涤。

3、换用新鲜的蒸馏水，再洗涤。

4、用甲基绿-派洛宁染色液染色。

5、显微镜下观察。

(四) 荧光染色

1、如果进行免疫荧光染色，在染色后应70％乙醇洗涤2次。

2、95%乙醇脱水2 min。

3、PBS或生理盐水或TBS等用于免疫染色或荧光染料染色的溶液浸泡。

4、进行免疫荧光染色或其它荧光染料的染色。

注意事项：

首次使用染色液时建议先取1~2个样品做预实验。

甲基绿-派洛宁染色液染色可以根据染色结果和要求调整时间。

有些粘液细胞有可能被派洛宁染成红色，应注意区分。

为了您的和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。