改良油红 O 染色液
简介:
脂质(Lipid)是中性脂肪、类脂及其衍生物的总称,其共同的物理特性是不溶于水,易溶于有机溶剂(如乙醇、乙醚等)。人体的脂肪主要有两种:1、储存脂肪,如中性脂肪,主要分布于皮下、肾、胰腺等部位。2、结构脂肪,如类脂(磷脂、糖脂、胆固醇等),主要分布于细胞内。中性脂肪(Neutral fat)是由三分子脂肪酸和一分子甘油组成的脂类,呈中性。中性脂肪是储存能量的方式之一,在氧化时释放出能量。中性脂肪
染色经常采用苏丹Ⅱ、苏丹Ⅲ、苏丹Ⅳ、苏丹黑 B、油红 O 法等。传统方法采用苏丹 染料,最近发现偶氮染料油红 O 更适合脂肪的染色。油红 O 是很强的脂溶剂和染脂剂, 较易与甘油三脂结合呈小脂滴状,与磷脂结合力稍差。其染色原理一般认为是物理上 的溶液作用或吸附作用,借溶液作用使脂肪染色。染料在冰冻切片内脂质的溶解度较 原溶剂中的溶解度更大,所以在染色时染料就从有机溶剂转移入脂质而使脂肪染色。
BIOISCO改良油红 O 染色液主要用于显示组织器官的脂肪变性和类脂质的异常沉着, 常发生于肝、肾、心等实质脏器的脂肪变性,细胞内出现多数中性脂肪滴;鉴别和诊 断脂肪组织中所发生的肿瘤及其性质。标本不采用含有乙醇的固定液(如需要固定可采 用福尔马林),样本不采用石蜡切片,需用冰冻切片或碳蜡切片,脂肪的阳性染色结果 呈橘黄至红色,但具体颜色因脂质浓度而定。
组成:
产品名称
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SL001-2×50ml
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SL001-2×100ml
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Storage
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试剂(A):改良
Oil Red O Stain
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A1: Oil Red O
Stain A
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30ml
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60ml
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4℃ 避光
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A1: Oil Red O
Stain B
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20ml
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40ml
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4℃
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充分摇匀 A1、A2 后,A1、A2 混合静置, 即为改良 Oil Red O Stain,不宜提前配制;如有条件尽量进行过滤,以免色素沉淀,造成假阳性
制;如有条件尽量进行过滤,以免色素沉淀,造成假阳性。
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试剂(B): 苏木素染色液
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50ml
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100ml
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RT 避光
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说明书
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一份
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保存条件:。
按要求存放,一年有效。
自备材料:
1、60%异丙醇
2、蒸馏水
3、1%盐酸溶液
4、甘油明胶或阿拉伯糖胶
操作步骤(仅供参考):
1、 冰冻切片厚度,不固定或福尔马林固定后水洗。
2、 入蒸馏水中稍冲洗。
3、 入异丙醇浸洗。
4、 入改良油红 O 染色液(加盖),密闭染色。
5、 分色: 入异丙醇稍洗以便去除染液。
6、 入蒸馏水稍微清洗。
7、 入苏木素染色液,复染核。
8、 (可选)1%盐酸溶液稍微分化一下。
9、 (可选)自来水漂洗或稀碳酸锂溶液促蓝。
10、 入蒸馏水稍微清洗。
11、 用滤纸吸干周围水分。甘油明胶或阿拉伯糖胶封固。
染色结果:
中性脂肪
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橙红色或橘红色
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细胞核
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蓝色
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注意事项:
1、 改良油红 O 染色液不够稳定,易产生沉淀,不宜提前配制。
2、 如果 60%的异丙醇不易获得,亦可采用 70%的乙醇。
3、 由于脂肪易溶于有机溶剂,所以显示脂肪一般不能像石蜡切片一样处理,而通过冰冻切 片染色来显示。
4、 作脂肪染色的冰冻切片不可太薄,过薄的切片常会使脂质丢失。
5、 苏木素染色液复染时间不能过长。
6、 染色结果不能长期保存,应尽快观察及照相。
7、 甘油明胶封固的样本,保存时间不长。如需长期保存,可以在盖玻片与载玻片交 界的边 缘用中性树胶封闭。