改良Masson三色染色液

简介：

结缔组织狭义上是含有胶原纤维、网状纤维、弹力纤维三种纤维，在这三种纤维中，胶原纤维(collagen fiber)是分布最广、含量最多的一种纤维。Masson三色染色是结缔组织染色中最经典的一种方法，也被成为马松染色，它是胶原纤维染色经典而权威的技术方法。所谓三色染色通常是指染胞核、能选择性的显示胶原纤维和肌纤维。本品所采用的染色方法与阴离子染料分子的大小和组织的渗透有关：分子量分子来体现的大小，小分子量能够对结构致密、渗透性低的组织进行穿透；而大分子量不能，且只能进入结构疏松、渗透性高的组织中。然而，淡绿或苯胺蓝的分子量都很大，因此Masson染色后出现的颜色分别为：肌纤维呈红色，胶原纤维呈绿色(淡绿)或蓝色(苯胺蓝)，这样的实验方法主要用来帮助区分胶原纤维和肌纤维。

BIOISCO改良Masson三色染色相比常规Masson三色染色最大的区别在于改良产品通过利用天青石蓝苏木素淡染细胞核。它的特点在于分化时间比较短(仅需1～2min)；色彩清晰鲜艳；适用范围广，适宜于组织的冰冻切片、石蜡切片等染色；所染切片能够保存较长时间且不会轻易褪色。胶原纤维呈蓝色，肌纤维、胞质、纤维素、角蛋白和红细胞呈红色，胞核呈蓝褐色，主要用于区分胶原纤维和肌纤维。

产品组成：

有效期：

一年有效。

自备材料：

1、10%的福尔马林固定液

2、蒸馏水

3、不同浓度乙醇

操作步骤(仅供参考)：

1、组织放入10%的福尔马林中固定，常规脱水包埋。

2、切片厚4μm，常规脱蜡至水。

3、切片入Bouin液，在室温下作用一晚或放入37℃的温箱内2h 进行媒染，然后流水冲洗至切片上的黄色消失。

4、天青石蓝染色液滴染2~3min。稍轻柔水洗。

5、Mayer苏木素染色液滴染2~3min。稍水洗。

6、酸性乙醇分化液分化数秒。流水冲洗10min。

7、丽春红品红染色液滴染10min。蒸馏水稍冲洗。

8、磷钼酸溶液处理约10min。

9、处理完倾去上液，切片不用水洗，直接滴入苯胺蓝染色液染5min。

10、使用弱酸溶液处理2min。

11、95%的乙醇快速脱水。无水乙醇脱水3次，每次时间不宜过长，在5~10s范围内。

12、二甲苯透明3次，每次1~2min。

13、中性树胶封固。

染色结果：

胶原纤维肉为蓝色

肌纤维、胞质、纤维素、角蛋白和红细胞呈红色

细胞胞核为蓝褐色

注意事项：

1、应尽量选用干净的切片脱蜡。酸性乙醇的分化时间应根据切片薄厚，组织的类别和新旧而定。

2、磷钼酸一方面的作用是使染上红色的胶原纤维被分化成无色或淡红色，而肌纤维、纤维素等仍呈鲜红色；另一方面的作用是对胶原纤维又起媒染作用，使胶原纤维与苯胺蓝液较易结合。

3、苯胺蓝液染色后用弱酸溶液处理，目的是为了除去原浆内的蓝色，使染色鲜艳和清晰。如Zenker液固定的组织，弱酸溶液处理可延长至5min。

4、弱酸溶液可使色彩更清晰鲜艳，如过实验需求量较大可自行配制0.1～0.3%乙酸溶液予以替代。