NGSbead磁珠专为二代测序建库时DNA的选择性或非选择性回收，以及PCR产物的纯化回收而设计。该片段分选试剂盒适用于高通量测序文库（NGS）构建中DNA 片段大小快速分选和回收。 NGSbead直接分散在结合缓冲液中，调整磁珠悬浮液和样品的体积比，可以选择左侧、右侧或双侧尺寸的DNA 片段。纯化后的片段不含核苷酸、引物二聚体、接头、酶和盐等污染物。 NGSbead为新一代测序工作流程提供了高效的基于磁珠的净化系统，是专门为配套自动化工作台开发的大规模、高通量的片段分选试剂盒，可以适用于几乎所有自动化仪器，也可人工进行少量样品的片段分离。

■产品性能
洗脱得到的DNA纯度高，A260/A280的比值在 1.7-1.9之间, A260/A230的比值通常在2.0以上。磁珠回收率高， 500bp以上回收90%，200bp以上回收80%，100bp以上回收70%。

■应用方向
? 高通量测序文库（NGS）构建中DNA 片段大小快速分选和回收；
? 可以选择左侧、右侧或双侧尺寸的DNA 片段；
? 1.8倍体积悬浮液结合后，洗涤，洗脱，可用于PCR、酶反应产物的纯化。

■注意事项
1、 磁珠保存在去离子水中，冷冻、干燥和离心可能会影响磁珠的使用效果；
2、 磁珠由于重力作用而沉降属正常现象，使用前，务必充分振荡混匀磁珠；

■使用方法
试剂组成

NGSbead：使用前涡旋20秒，使其彻底混匀。
Wash buffer: 80%乙醇（现配现用，4℃保存时间不超过7天）；
Elution buffer: 10 mM Tris-HCl（PH 8.0）或去离子水；

一、 第一次磁珠分选（去除不需要的大片段DNA）
1. NGSbead磁珠室温放置30 min，涡旋混匀至磁珠悬液颜色均一。参考表1，向反应液中加入适量的磁珠溶液，吹打至少10 次以混匀混合液，室温静置5 min。

2. 将96 孔板放在磁力架上分离磁珠，静置至少5 min，直至上清完全澄清。
3. 转移上清至新96 孔板中，丢弃结合有大片段DNA 的磁珠。（注意：不要丢弃上清）

二、 第二次磁珠分选（去除不需要的小片段DNA）
1. 涡旋重悬混匀 NGSbead磁珠至颜色均一，将磁珠溶液加入上述上清中（参考表1），吹打至少10 次以混匀，室温静置5 min。
2. 将96 孔板放在磁力架上分离磁珠，静置至少5 min，直至上清完全澄清。
3. 小心移弃含有不需要DNA 的上清。（注意：不要丢弃磁珠）

三、 乙醇清洗
1. 乙醇清洗步骤中，需要将96 孔板放在磁力架上，在清洗过程中勿碰触磁珠。加入200 μL 的80%乙醇，室温静置至少30 s，移弃上清。重复该步骤一次。

四、 洗脱
1. 将96 孔板放在磁力架上，室温静置5 min，挥发残留的乙醇。（注意：干燥至管底无明显液滴；勿过度干燥磁珠，防止DNA 回收效率过低）。
2. 从磁力架上移走96 孔板，加入10-50 μL 的Elution buffer重悬吹打或振荡混匀磁珠，室温放置2-5 min。（Elution buffer在65-70℃中预热后洗脱效果更好）
3. 将96 孔板放置在磁力架上。溶液澄清后，转移上清至新的96 孔板中。

注意：1. 提供的操作步骤是去除小片段和大片段，获得中间范围内片段的过程。若实验目的是去掉小片段回收大片段或去掉大片段回收小片段，仅需选择合适的磁珠溶液比例操作即可。 2. 该试剂盒磁珠溶液可用于300 bp~800 bp 片段的回收。 3. 由于回收获得的片段的大小与磁珠溶液和样品比例有关，加样量的准确性十分重要，且样品体积尽量不要太小，减少加样误差，一般在50 μL~150 μL 范围。