2×CTAB抽提缓冲液
产品简介:
从植物组织中制备基因组DNA较常采用的方法有氯化离心法、CTAB抽提法等。CTAB抽提法是经典的植物DNA提取法,可以用于多种不同类型植物样品DNA的提取,获得的量很高,但是纯度一般,但是足够用于大多数分子生物学实验。CTAB抽提液的有效成分为CTAB(十六烷基三乙基溴化铵),临用前加入2-ME,使其更有效,更稳定。
组成:
产品名称
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BB041-500ml
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Storage
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试剂(A): 2×CTAB抽提缓冲液
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500ml
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RT
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试剂(B): 2-ME
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1ml
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RT 避光
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说明书
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一份
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保存条件:
室温保存,一年有效。
操作步骤(仅供参考):
1、加0.2%的2-ME于2×CTAB抽提缓冲液液中,65℃预热30-60min.
2、取适量植物材料,液氮中迅速研磨成粉。
3、研好后迅速用钥匙将适量冻粉装进2ml离心管,防止DNA降解。
4、将预热好的CTAB提取缓冲液1ml迅速加入含冻粉的2ml离心管中,颠倒混匀6-8次,65℃保温30-40min,其每隔10min混匀6-8次,使冻粉充分溶入CTAB提取液中。
5、保温时间到,在离心管中加入等体积的24:1氯仿/异戊醇,再次抽提,轻轻震荡混匀至叶粉变白。
6、室温下,8000rpm离心15min。
7、再次转移上清液于另一个1.5ml离心管中,加入等体积的24:1氯仿/异戊醇,再次抽提,轻轻震荡。
8、室温下,8000rpm离心15min。
9、再次转移上清液于另一个1.5ml离心管中,加入等0.8倍体积的异丙醇,沉淀DNA。
10、4℃,12000rpm离心10min。弃上清收集沉淀。
11、加入1ml75%的乙醇进行洗涤,室温下,8000rpm离心3min。
12、重复步骤11。
13、倒掉乙醇,离心管继续离心5min,8000rpm。
14、取出离心管,用枪头吸净多余的乙醇,于超净台上吹到沉淀完全干燥,呈凝胶状。加入40微升的含R Nase A ddH2O溶解DNA。
注意事项:
1、 如果每次的使用量很小,可以适当分装后再使用。
2、 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。