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生物试剂 2×CTAB提取缓冲液

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上海跃腾生物技术有限公司
产品详情


2×CTAB抽提缓冲

产品简介:

从植物组织中制备基因组DNA较常采用的方法有氯化离心法、CTAB抽提法等。CTAB抽提法是经典的植物DNA提取法,可以用于多种不同类型植物样品DNA的提取,获得的量很高,但是纯度一般,但是足够用于大多数分子生物学实验。CTAB抽提液的有效成分为CTAB(十六烷基三乙基溴化铵),临用前加入2-ME,使其更有效,更稳定。

组成:

产品名称

BB041-500ml

Storage

试剂(A): 2×CTAB抽提缓冲

500ml

RT

试剂(B): 2-ME

1ml

RT 避光

说明书

一份

保存条件:

室温保存,一年有效。

操作步骤(仅供参考)

1、0.2%2-ME2×CTAB抽提缓冲液中,65℃预热30-60min.

2、取适量植物材料,液氮中迅速研磨成粉。

3、研好后迅速用钥匙将适量冻粉装进2ml离心管,防止DNA降解。

4、将预热好的CTAB提取缓冲液1ml迅速加入含冻粉的2ml离心管中,颠倒混匀6-8次,65℃保温30-40min,其每隔10min混匀6-8次,使冻粉充分溶入CTAB提取液中。

5、保温时间到,在离心管中加入等体积的24:1氯仿/异戊醇再次抽提,轻轻震荡混匀至叶粉变白。

6、室温下,8000rpm离心15min

7、再次转移上清液于另一个1.5ml离心管中,加入等体积的24:1氯仿/异戊醇,再次抽提,轻轻震荡。

8、室温下,8000rpm离心15min

9、再次转移上清液于另一个1.5ml离心管中,加入等0.8倍体积的异丙醇,沉淀DNA

10、4℃,12000rpm离心10min。弃上清收集沉淀。

11、加入1ml75%的乙醇进行洗涤,室温下,8000rpm离心3min

12、重复步骤11

13、倒掉乙醇,离心管继续离心5min8000rpm

14、取出离心管,用枪头吸净多余的乙醇,于超净台上吹到沉淀完全干燥,呈凝胶状。加入40微升的含R Nase A ddH2O溶解DNA

注意事项:

1、 如果每次的使用量很小,可以适当分装后再使用。

2、 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

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