尿蛋白检测试剂盒(丽春红比色法)

简介：

在尿液样本中加入蛋白沉淀剂和丽春红S，离心，蛋白质-染料复合物被沉淀下来，将沉淀物加入碱性溶液溶解后，分光光度法检测吸光度，计算蛋白含量。尿蛋白检测试剂盒(丽春红比色法)主要用于定量检测尿液中蛋白含量，较双缩脲法灵敏，对白蛋白的敏感性比球蛋白要高。

组成：

自备材料：

1、 蒸馏水

2、 离心管

3、 比色杯

4、 分光光度计

操作步骤(仅供参考)：

1、 取适量丽春红S试剂(10×)，加入蒸馏水，稀释至1×，室温可保存3～4个月。 2、 取1ml蛋白标准配制液加入到蛋白标准(BSA)(20mg)中，充分溶解后配制成20mg/ml蛋白标准溶液，配制后可立即使用，溶解后的蛋白标准溶液应-20℃保存。

3、 取适量蛋白标准，稀释至浓度分别为200、400、600、800、1000、1200、1600μg/ml或所需浓度。各取上述稀释度的蛋白标准，与待测样本操作相同，用比色制成标准曲线。特别提示：待测蛋白溶解于什么样的稀释液中，蛋白标准也宜溶解于什么样的稀释液中。例如待测蛋白溶解月蔗糖中，亦取20mg/ml蛋白标准溶解于蔗糖中。一般也可以用0.9%NaCl或PBS作为溶解BSA稀释液。稀释后的蛋白标准也应-20℃长期保存。

4、 定性实验：取新鲜尿液转移入小试管。滴加磺基水杨酸溶液3～4滴，形成界面。立即观察，如有浑浊，提示尿液中含有蛋白质，浑浊深浅代表蛋白含量。

以半定量测得蛋白浓度调整样本整体浓度

阴性(-)	不显浑浊
可疑(±)	轻微浑浊，隐约可见，含蛋白量约为0.05～0.2g/L
( )	明显浑浊，无颗粒出现，含蛋白量约为0.3g/L
(2 )	稀薄乳样浑浊，出现颗粒，，含蛋白量约为1g/L
(3 )	乳浊，有絮片状沉淀，含蛋白量约为3g/L
(4 )	絮片状沉淀，含蛋白量＞5g/L

蛋白浓度	样本用量
＜1g/L	100μl
1～3g/L	50μl(测得值×2)
＜1g/L	10μl(测得值×10)

5、 取小试管，按上述要求量加入待测样本，再加入1×丽春红S试剂，混匀。

6、 离心，将上清缓缓倒出后，置于滤纸上数分钟，并用小滤纸条吸附管壁上多余的试剂(注意勿触及管底沉淀)。

7、 加入 Alkaline buffer至沉淀中，混合使沉淀溶解。

8、 测定波长处的吸光值，如无,之间的波长也可。

9、 根据标准曲线计算出样品的蛋白浓度。

参考区间：46.5±18.1 mg/L

注意事项：

1、 蛋白标准(BSA)粉末溶解于蛋白标准配制液后，即获得蛋白标准原液，该原液中含有防腐剂，不影响后续使用，该蛋白标准原液-20℃长期保存。

2、 待测蛋白溶解于什么样的稀释液中，蛋白标准也宜溶解于什么样的稀释液中，否者待测蛋白与蛋白标准中所含非蛋白成分不一致，有可能导致测定不准确。

3、 待测蛋白含量＜0.1g/L时，可用标本加丽春红S试剂(10×)，混匀，余下操作同上。

4、 本法较为灵敏,较比浊法误差小，胆红素＜mg/L时对结果无影响；本法不受室温影响。

5、 为了您的和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

有效期：12个月有效。