无机磷检测试剂盒（硫酸亚铁钼蓝比色法）

简介：

血清中的无机磷(Inorganic phosphorous)主要由H₂PO₄^-和 HPO₄^2-两种磷酸根阴离子组成，这两种阴离子在在不同的pH环境下可以实现快速相互转换。世界卫生组织(WHO)推荐的常规检测方法为比色法，我国卫生部临检中心推荐的常规方法为硫酸亚铁钼蓝比色法和米吐尔钼蓝比色法。

BIOISCO生物无机磷检测试剂盒（硫酸亚铁钼蓝比色法）首先经硫酸亚铁提纯蛋白，利用无机磷与钼酸铵结合生成磷钼酸铵，后者被硫酸亚铁还原成蓝紫色的复合物，通过分光光度计检测610nm处吸光度值，根据公式计算出无机磷含量。可用于定量检测无机磷，亦可用于尿液检测。本试剂盒仅用于科研领域，不宜用于临床诊断或其他用途。

组成：

保存条件：

4℃避光保存，一年有效。

操作步骤（仅供参考）：

1、 (选做)制备样品：

①血浆、血清样品：取0.1ml 待测血浆、血清样品，加入2.4ml Pi Assay buffer，充分混匀，室温静置10min，3000r/min 离心后取上清，-20℃冻存，用于Pi的检测。

②尿液样品：取适量的待测尿液，用蒸馏水做1:10-1:20稀释。取稀释后的尿液样品，加入2.4mlPi Assay buffer，充分混匀，室温静置10min，3000r/min 离心后取上清，-20℃冻存，用于Pi的检测。

③细胞或组织样品：取恰当细胞或组织进行匀浆，低速离心取上清。取匀浆样品，加入2.4mlPi Assay buffer，充分混匀，室温静置10min，3000r/min 离心后取上清，-20℃冻存，用于Pi的检测。

④高浓度样品：如果样品中含有较高浓度的Pi，可以使用去离子水稀释。

⑤(选做)样品准备完毕后可以用BCA蛋白浓度测定试剂盒测定蛋白浓度，以便于后续计算单位蛋白重量组织或细胞内的Pi含量

2、 制备磷标准工作液：

取适量的磷标准(1mg/ml)，按磷标准(1mg/ml)：标准品稀释液=1:24的比例稀释，即获得磷标准工作液(1.292mmol/L)，-20℃冻存，用于Pi的检测。

3、Pi 检测：按下表操作。

4、 混匀，室温静置：分光光度计640nm处检测，比色杯光径1.0cm，以空白管调零，读取各管吸光度值。

计算:

血清、血浆中无机磷计算公式：磷(mmol/L)=(A测定/A标准)×1.292

尿液中无机磷计算公式：磷(mmol/d)=(A测定/A标准)×1.292×N×24h

尿量(L)组织中磷计算公式：磷(mmol/mg)=(A测定/A标准)×1.292/待测样品蛋白浓度(mg/L)

参考区间：

健康成年人血清磷浓度：0.96-1.62mmol/L(3-5mg/dl)

儿童血清磷浓度：1.45-2.1mmol/L(4.5-6.5mg/dl)

注意事项：

1、 溶血样本对检测有干扰，尽量避免采用溶血样本。

2、 本法能够用于自动生化分析仪终点检测法。

3、 如果样品浓度过高，应用蒸馏水稀释后重测，结果乘以稀释倍数。