脱氧核糖核酸(DNA)检测试剂盒(二苯胺比色法)

简介：

脱氧核糖核酸中的α—脱氧核糖在酸性环境中变成ω—羟基—γ酮基戊醛与二苯胺试剂一起加热产生蓝色化合物，在595nm处有最大的吸收，在每毫升含DNA20~400微克范围内，光密度与DNA的浓度成正比，在反应液中加入少量乙醛，可以提高反应的灵敏度。

组成：

操作步骤(仅供参考)：

（一）DNA标准曲线的制作

取6支试管，编号，按下表加入试剂

加毕，摇匀，于60℃恒温水浴中保温1小时，（或于沸水中煮沸15分钟，冷却测0.D595nm值。）以吸光度为纵坐标，DNA含量（ug/ml）为横坐标，绘制标准曲线。

（二）样品的测定

取2支试管，各加0.2毫升的待测液（内含DNA应在标准曲线可测范围之内）加蒸馏水稀释至0.5毫升，再加1毫升二苯胺试剂，摇匀，其操作步骤与标准曲线的制作相同。根据测得的吸光度值，从标准曲线上查出相当该吸光度DNA的含量，按下式计算出样品中DNA的百分含量。

DNA含量/毫升待测液=标准曲线查得值×稀释倍数?

注意事项：

1.二茉胺法测定DNA含量灵敏度不高，待测样品中DNA含量低于50mg/L即难以测定。乙醛可增加二苯胺法测定DNA的发色量，又可减少脱氧木糖和阿拉伯糖的干扰，能显著提高测定的灵敏度。

2.样品中含有少量RNA并不影响测定，但因蛋白质、多种糖类及其衍生物、芳香醛、羟基醛等能与二苯胺反应形成有色化合物，故能干扰DNA定理。

3、本产品仅供科研使用，严禁它用。