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生物试剂 葡萄糖检测试剂盒(GOD-POD微板法)

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上海跃腾生物技术有限公司
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脱氧核糖核酸(DNA)检测试剂盒(苯胺比色法)

简介:

脱氧核糖核酸中的α—脱氧核糖在酸性环境中变成ω—羟基—γ酮基戊醛与二苯胺试剂一起加热产生蓝色化合物,在595nm处有最大的吸收,在每毫升含DNA20~400微克范围内,光密度与DNA的浓度成正比,在反应液中加入少量乙醛,可以提高反应的灵敏度。

组成:

产品名称

KB018-100T

Storage

试剂(A)DNA标准溶液(200μg/mL

2×1ml

-20°C

试剂(B):二苯胺溶液

100ml

RT 避光

试剂(C): 乙醛溶液

1ml

4°C

临用前试剂B:试剂C=1001比例混匀即为二苯胺试剂。

说明书

一份

操作步骤(仅供参考)

(一)DNA标准曲线的制作

6支试管,编号,按下表加入试剂

编号

0

1

2

3

4

5

DNA标准溶液(μl

0

100

200

300

400

500

蒸馏水(μl

500

400

300

200

100

0

二苯胺试剂(μl

1000

1000

1000

1000

1000

1000

加毕,摇匀,于60℃恒温水浴中保温1小时,(或于沸水中煮沸15分钟,冷却测0.D595nm值。)以吸光度为纵坐标,DNA含量(ug/ml)为横坐标,绘制标准曲线。

(二)样品的测定

2支试管,各加0.2毫升的待测液(内含DNA应在标准曲线可测范围之内)加蒸馏水稀释至0.5毫升,再加1毫升二苯胺试剂,摇匀,其操作步骤与标准曲线的制作相同。根据测得的吸光度值,从标准曲线上查出相当该吸光度DNA的含量,按下式计算出样品中DNA的百分含量。

DNA含量/毫升待测液=标准曲线查得值×稀释倍数?

注意事项:

1.二茉胺法测定DNA含量灵敏度不高,待测样品中DNA含量低于50mg/L即难以测定。乙醛可增加二苯胺法测定DNA的发色量,又可减少脱氧木糖和阿拉伯糖的干扰,能显著提高测定的灵敏度。

2.样品中含有少量RNA并不影响测定,但因蛋白质、多种糖类及其衍生物、芳香醛、羟基醛等能与二苯胺反应形成有色化合物,故能干扰DNA定理。

3本产品仅供科研使用,严禁它用。

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