上海跃腾生物技术有限公司
DNS 试剂（
NY/T 法）
简介：
植物体内的碳素营养状况以及农产品的品质形状，常以糖含量作为重要指标。单糖和某些寡糖(如麦芽
糖)含有游离的醛基或酮基，具有还原性，属于还原糖；多糖和蔗糖等属于非还原糖。可以利用多糖能被酸
水解为单糖的特性通过测定水解后的单糖含量对总糖进行测定。
伊势久植物总糖和还原糖检测试剂盒(硝基水杨酸法)检测原理是还原糖在碱性条件下被氧化成糖酸，
3,5-二硝基水杨酸被还原为棕红色的氨基化合物。在一定范围内，还原糖的量与棕红色产物的颜色深浅程
度呈一定比例关系。在处测定棕红色物质的吸光度，该吸光度值与还原糖含量呈线性关系，利用比色法和
标准曲线测得样品中的还原糖和总糖的含量。本试剂盒仅用于科研领域，不宜用于临床诊断或其他用途。
组成：
产品名称
KB001-100ml
KB001-500ml
Storage
DNS 试剂（
NY/T 法）
100ml
500ml
4℃ 避光
说明书
一份
保存条件：
4℃避光保存，一年有效。
自备材料：
1、 蒸馏水
2、 50ml 离心管
3、 离心机
4、 水浴锅或恒温箱
5、 分光光度计
6、 盐酸溶液、氢氧化钠溶液
操作步骤(仅供参考)：
1、 还原糖的提取：
①称取植物样品，剪碎，加入蒸馏水匀浆，转移至烧杯或三角瓶中，用蒸馏水冲洗研磨器，洗出液也转移
至该容器。
②水浴，并不时搅拌，以便还原糖彻底浸出。
③将沉淀和浸出液转移至 l 离心管，离心。
④留取上清液，向沉淀中加入蒸馏水，混匀，再次离心。
⑤留取上清液，将获得的上清液合并，用蒸馏水定容 (提取液)，混匀，作为还原糖待测液。
2、 总糖的水解和提取：最终解释权所有 ? 伊势久（江苏连云港）生物科技有限责任公司，保留一切权利
服务热线：0518-81263339
官网:http://www.bio149.com
伊势久(江苏连云港)生物科技有限责任公司
江苏省连云港市海州区花果山大道 17 号
①称取植物样品，剪碎，加入蒸馏水匀浆，转移至烧杯或三角瓶中，用蒸馏水冲洗研磨器，洗出液也转移
至该容器。
②向容器中加入盐酸溶液，搅拌均匀，煮沸，并不时搅拌。
③取滴加于载玻片上，滴加显色液，检查水解是否完全，如已经水解完全，则不显示蓝色。
④水解完毕后，冷却至室温，加入氢氧化钠溶液，使溶液 pH 至 7.4，用蒸馏水定容，混匀，离心或过滤。
⑤取上清或滤液，用蒸馏水定容，成稀释的总糖水解液(提取液)，取 1ml 总糖水解液，测定其还原糖的含
量。
3、 制作葡萄糖标准曲线：取干净离心管或试管，按下表进行操作，以 0 号调零，检测吸光度，以吸光度
值为纵坐标，各标准浓度(mg/ml)为横坐标作图得标准曲线。
加入物质(ml)
0
1
2
3
4
5
Glu 标准(1mg/ml)
0
0.2
0.4
0.6
0.8
1.0
蒸馏水
1
0.8
0.6
0.4
0.2
0
DNS 检测液
2
2
2
2
2
2
沸水浴中准确煮沸 5min，取出，自来水冷却至室温。
蒸馏水
9.0
9.0
9.0
9.0
9.0
9.0
相当于葡萄糖量
0
0.2
0.4
0.6
0.8
1.0
计算：
还原糖的百分含量：
还原糖含量(%)=(C×VT)/(m×Vs)×100
总糖的百分含量：
总糖含量(%)=(C×VT)/(m×Vs)×100×10×0.9
式中：C=从标准曲线查的糖量(mg)
VT=提取液的体积(ml)
m=植物样品的质量(mg)
Vs=测定时用的样品体积(ml)
注意事项：
1、 上述低温试剂避免反复冻融，以免失效或效率下降。
2、 待测样本如不能及时测定，应置于 2~8℃保存，3 天内稳定。
3、 如果样品还原糖浓度过高，应用蒸馏水稀释后重测，结果乘以稀释倍数。
4、 总糖计算公式在测定干扰杂质很少、还原糖含量相对总糖含量很少时使用，×0.9 是为了从测定出的总
糖水解成单糖中，扣除水解时所消耗的水量。
