柠檬酸钠抗原修复液(50×)
简介:
抗原修复是利用化学试剂和热的作用将封闭的抗原或肽链发生扭曲的抗原重新暴露出来或修正过来的过程。柠檬酸钠抗原修复液可有效去除醛类固定试剂导致的蛋白之间的交联,充分暴露石蜡切片等样品中的抗原表位,从而大大改善免疫染色效果。主要用于用于石蜡切片、冰冻切片等样品使用多聚甲醛、甲醛或其它醛类试剂固定后的抗原修复。柠檬酸钠抗原修复液是常用的抗原修复液,主要由柠檬酸钠组成,调PH值至6.0。
通常石蜡切片都需进行抗原修复处理,而冰冻切片可以不进行抗原修复处理。抗原修复会大大改善石蜡切片的免疫染色效果,但对于冰冻切片的染色效果很多文献资料表明也有显著改善。特别是当冰冻切片免疫染色效果欠佳时,可以考虑尝试进行抗原修复。从原理上来看,无论冰冻切片还是细胞爬片等,只要是用多聚甲醛、甲醛或其它醛类试剂固定的样品,进行抗原修复都会有效去除蛋白之间的交联,充分暴露抗原表位,从而大大改善免疫染色效果。
BIOISCO 柠檬酸钠抗原修复液(50×)是50倍浓缩的,在具体使用时将其稀释50倍即为工作液。该产品仅适用于科研实验,不可做他用。
组成:
产品名称 |
IH036-100ml |
Storage |
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柠檬酸钠抗原修复液(50×) |
100ml |
RT |
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说明书 |
一份 |
有效期:
常温保存,一年有效。
操作步骤(仅供参考):
1、石蜡切片:
1)脱蜡:切片在二甲苯中脱蜡2×5 min,无水乙醇2×5 min,90%乙醇2×5 min,70%乙醇5 min。蒸馏水2×5 min。
2)抗原修复:将切片浸泡在抗原修复液(1×)中,95-100℃加热约10~20 min(最佳的加热时间需根据不同的样品和目的蛋白自行摸索)。抗原修复液(1×)使用前需预热到95-100℃。加热可以使用水浴锅或微波炉。如果使用微波炉加热,需注意避免修复液暴沸。随后大约在20~30 min冷却至室温。用免疫染色洗涤液洗涤1~2次,每次3-5 min。即可进行封闭等后续的免疫染色步骤。
2、 冰冻切片:用免疫染色洗涤液洗涤切片5 min。抗原修复的过程如石蜡切片的抗原修复过程。
3、 其它样品的抗原修复,可以参考石蜡切片的步骤进行。
注意事项:
1、为了您的自身,使用试剂前,请做好防护,如穿实验服,戴手套等。