Tris抗原修复液(10×,pH10.0)

简介：

柠檬酸盐、EDTA或Tris等缓冲液在热的条件下可以使被福尔马林屏蔽的抗原重新暴露出来，同时又不会对抗原表位造成破坏，从而提高抗原的检出率，降低背景染色，提高诊断的准确率。

Tris抗原修复液(10×,pH10.0)由Tris、微量Tween20等组成，可以有效去除醛类固定试剂导致的蛋白之间的交联，充分暴露石蜡切片等样品中的抗原表位，可以用于石蜡切片、冰冻切片等样品使用多聚甲醛、甲醛或其他醛类试剂固定后的抗原修复。抗原修复可以提高石蜡切片的免疫染色效果，亦可以不同程度的提高冰冻切片的染色效果。当冰冻切片免疫染色效果不理想时，可考虑进行抗原修复。按照每个片子需要10ml抗原修复液(1×)计算，100ml抗原修复液(10×)可以用于100个样本的抗原修复。

组成：

保存条件：

4℃保存，一年有效

自备材料：

1、系列乙醇

2、双蒸水或去离子水

3、加热设备

4、免疫染色洗涤液

操作步骤(仅供参考)：

一)石蜡切片

1、脱蜡至水

①二甲苯3次，每次3～5min。

②无水乙醇脱水，每次3～5min。

③95%乙醇脱水，每次3～5min。

④85%乙醇脱水，每次3～5min。

⑤75%乙醇脱水，每次3～5min。

⑥蒸馏水水冲2次，每次3～5min。

2、抗原修复

①用去离子水或双蒸水稀释Tris抗原修复液(10×,pH10.0)至1×。

②将切片浸泡在Tris-EDTA抗原修复液(1×)中，加热约10～30min。

③抗原修复液(1×)使用前需预热。如果使用微波炉加热，避免暴沸和过多的水分蒸发。随后大约在20～30min内冷却至室温。

3、免疫染色洗涤液洗涤1～2次，每次3～5min。

4、封闭等后续的免疫染色步骤。

二)冰冻切片：

1、用去离子水或双蒸水稀释Tris抗原修复液(10×,pH10.0)至1×。

2、免疫染色洗涤液洗涤切片5min。

3、将切片浸泡在抗原修复液(1×)中，95℃或沸水加热约10～30min。

4、抗原修复液(1×)使用前预热至95～100℃。如果使用微波炉加热，避免暴沸和过多的水分蒸发。随后大约在20～30min内冷却至室温。

5、免疫染色洗涤液洗涤1～2次，每次3～5min。

6、进行封闭等后续的免疫染色步骤。

三)其它样品：

其他样品参考石蜡切片或冰冻切片进行操作。

注意事项：

1、浸泡在抗原修复液(1×)中，加热时间需根据不同的样品和目的蛋白自行摸索。

2、为了您的和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

3、本产品仅供科研使用，严禁它用。