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磁珠法PCR产物纯化试剂盒酶切核酸片段产物纯化

¥ 1500

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  • 10000盒 总供应
  • 江苏 苏州 所在地
苏州北科纳米科技有限公司
产品详情


货号 CAS号 编号 包装 参数 库存 补货期 价格
BK2021081233 CAS BK2021081233 100 0

产品介绍

磁珠法PCR产物纯化试剂盒是苏州北科震泽生物科技有限公司最新研制的一种PCR产物纯化试剂盒。本试剂盒是利用磁性纳米分离技术从PCR反应产物及其他酶促反应物中,简单、快速、高效提取纯化高质量DNA,并能有效的除去蛋白质,dNTP,引物等杂质,适用于自动化核酸纯化平台,纯化后的DNA A260/A280的比值在1.7-1.9之间,A260/A230的比值通常在2.0以上,可以应用到各类下游分子生物学实验。


特点

l 适用范围广,回收效率高,对于100 bp~50 kb之间的DNA片段回收效率在95%以上。

l 样品体积范围广,不需要离心。

l 操作简单快速,20~30min完成核酸纯化。

l 实现核酸纯化高通量化和自动化。


保存方法及注意事项

请将试剂盒中的 Beads置于2-8℃保存,其余试剂室温保存,有效期详见包装。

l 严禁冰冻、离心。冰冻、离心可能会对磁珠造成不可逆的损害。

l 磁珠长期放置后会聚集成团,从而使磁珠表面积减小,降低样品回收得率,使用前一定要涡旋振荡彻底混匀磁珠(通常需涡旋振荡20秒)。

l 本试剂盒不适用于纯化回收小于100 bp的DNA片段,如果要回收小于100bp的DNA片段,可将PuriMag PCRbead的用量增加到样品体积的4倍。


纯化回收得率的计算

建议通过琼脂糖电泳纯化前后的样品进行回收得率的计算,不建议通过260nm处的光吸收值来计算回收得率。溶液中单链、双链DNA和dNTP以及一些纯化前的某些杂质在260nm处都有光吸收,这样在计算回收前样品中DNA浓度时会得到一个虚高的DNA浓度值。


试剂盒组成

组分

100

保存

PCRbead

4 ml

2-8℃

Wash buffer

75%乙醇(用户自备)

常温

Elution buffer

5 ml

常温

异丙醇

用户自备

常温

DNA浓度及纯度检测:(1)得到的基因组DNA片段大小与样品保存时间、操作过程中剪切力等因素有关,所得DNA片段可用琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计检测浓度和纯度。2DNA应在OD260处有显著吸收峰,OD260=1相当于大约50ng/ul双链DNA40ng/ul单链DNAOD260/OD280比值应为1.7~1.9,如果洗脱时使用去离子水,比值会偏低,因为pH和离子会影响吸光度,并不表示纯度低。

操作步骤

结合→

1)1.5ml的离心管或PCR管中加入待纯化的PCR产物,然后加入2倍样品体积的PuriMag PCRbead,颠倒混匀数次,磁分离后吸弃上清液。

洗涤→

2)向离心管中加入150 μlWash buffer,移液枪缓慢吹打混匀,静置1 min,于磁力架上静置20 s,小心吸弃上清液。重复该步骤一次。上清液尽量移除干净,室温晾干5 min,让残留乙醇挥发干净,以免影响后续实验。

洗脱→

3)向离心管中加入10~50 ulElution bufferElution buffer65-70 ℃中预热后洗脱效果更好,减小洗脱体积或多次洗脱可增大DNA浓度),移液枪缓慢吹打混匀1~2 min,将离心管放到磁力架上静置20 s,小心将上清液吸入新离心管中,即为纯化的PCR产物,可存放于2~8 ℃,长期存放需放置于-20 ℃


温馨提示:苏州北科震泽供应产品仅用于科研,不能用于人体,部分网站示意图源自互联网,图片仅供参考,请以实际测试结果为准,如有侵权请联系我们立即删除。
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