• PhyZol RNA提取试剂

• Extraction Reagent

• 规格

• PH1420-50 | 50mL

• PH1420-100 | 100mL

• 存储

• Store@4℃ 避光，12个月有效。

• 产品简介

• PhyZol是Phygene自主研发和生产的用于细胞或组织的总RNA提取试剂。PhyZol采用与Invitrogen TRIzol完全相似的原理和方法，PhyZol颜色、抽提的方法和步骤亦与Invitrogen TRIzol完全相同。PhyZol含酚和异硫氰酸胍等物质，能迅速裂解细胞或组织并且灭活核酸酶，保持RNA的完整性。加入氯仿并离心后，溶液形成上清层为水相(无色)、中间层、下层为有机相(红色)。上清层用异丙醇沉淀回收总RNA，中间层用乙醇沉淀回收DNA，下层用异丙醇沉淀回收蛋白。

• Phygene的PhyZol总RNA提取试剂适用于从各种组织或细胞中快速分离总RNA，既可用于小量样品(50～100 mg组织、5×106细胞)，也可用于大量样品(1g组织/107细胞)。提取的总RNA质量高，可用于Northern blot、Dot blot、polyA筛选、体外翻译、RNase保护分析和分子克隆。

• PhyZol?具有以下特点：

• ①适用范围广；

• ②操作简单，整个过程1小时内完成；

• ③纯度高；

• ④污染少。

• 自备材料：

• 1、试剂：无水乙醇、氯仿、异丙醇、DEPC处理水等。

• 2、耗材： RNase广泛存在于人的皮肤上和体液及环境中，RNase是导致RNA降解的最主要物质，非常稳定。操作时应佩戴一次性口罩、手套、帽子。塑料制品、玻璃和金属物品、实验仪器等应清除RNase，移液器吸头、EP管等制品的RNase free处理尤为重要。

• 3、仪器：低温高速离心机、低温冰箱。

• 使用说明

• 操作步骤(仅供参考)：

• 1、样品准备

• ①贴壁细胞：接裂解：直接在培养瓶/皿中加入PhyZol裂解细胞，每10cm2面积加1mlphyZol，用移液器吹打混匀。

• 胰蛋白酶消化：用无菌PBS洗涤细胞后，加入含有0.05～0.25%胰蛋白酶的PBS处理细胞，当细胞脱离容器壁后，加入含有血清的培养基终止反应，将细胞溶液转移至无RNase的离心管中，5000～6000g离心5 min，收集细胞沉淀，去除上清。收集细胞时一定要将细胞培养液去除干净，否则裂解不完全，降低RNA收获率。

• ②悬浮细胞：无需清洗细胞，直接5000～6000 g离心5 min，收集细胞。每5×106～107动物、植物和酵母细胞或每107细菌细胞加入1ml PhyZol。

• ③组织：取新鲜动物或者植物组织或者-70℃冻存组织，50～100mg组织在液氮中充分研磨或者加入1ml PhyZol?研磨或者用匀浆器匀浆处理。样品体积一般不超过PhyZol体积的10%。研磨要迅速，以1min为佳。

• ④血液：取0.5～1 ml新鲜或冻存的血液，12000g离心5 min，去除血浆，加入1ml PhyZol，充分振荡混匀。

• 2、核酸分离：充分振荡混匀(可以置于低温/超低温冰箱冻存5～10 min后，充分振荡，反复1～3次)，将裂解样品或匀浆液室温放置5～10 min，使核蛋白与核酸完全分离。

• 3、样品分层：加入0.2 ml氯仿/1ml PhyZol，剧烈振荡15 s，室温放置2～3 min。置于4℃离心机，12000 g离心10～15 min。上层为水相，中间层和下层为有机相，RNA在上层水相。

• 4、沉淀RNA：吸取上层水相(约500μl)转移至无RNase的离心管中(不要吸取任何中间层物质,否则会有染色体DNA污染)，加入等体积异丙醇混匀，室温放置15～20 min。12000 g 4℃离心10 min，离心后管侧或管底形成胶状沉淀，弃上清。

• 5、洗涤RNA：加入1ml DEPC水配制的75%乙醇/1ml PhyZol?洗涤沉淀，室温放置5～10 min，7500g 4℃离心5 min，弃上清。室温干燥5～10 min，不宜过分干燥，否则RNA难以溶解。

• 6、溶解RNA：加入30～50ul RNase-free ddH2O充分溶解RNA，-70℃长期保存或直接用于后续试验。对于肝、胰腺、肾等组织中RNase含量高的样品，沉淀时用100%去离子甲酰胺溶解。

• 分析与定量：

• 1、测定样品在260 nm和280 nm的吸收值确定RNA的质量。按1OD=40pg RNA计算RNA的产率。OD260/280在1.8～2.2视为抽提RNA纯度较好。浓度在4μg/ml以上的样品适于用分光光度计测定。

• 2、进行甲醛变性琼脂糖电泳，确定RNA的完整性和污染情况。

• 3、核酸分析仪测定RNA的质量和纯度。

• 应用举例

• 分别利用本品PhyZol和Trizol从胶质细胞中提取Total RNA，利用1%琼脂糖凝胶电泳检测，所提取RNA具有较好完整性， OD值均＞1.9。

• 注意事项

• 1、样品保存：加入PhyZol混匀后，样品可在-70℃放置1～2月；RNA样品可以在70%酒精中-70℃保存2～4周：如果需要长期保存，应置于超低温冰箱中保存。

• 2、PhyZol是强腐蚀性物质，污染皮肤或眼睛后，立即用清水或生理盐水冲洗，必要时寻求医生的帮助。

• 3、PhyZol可常温运输，建议保存4℃保存。

• 4、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

• *Important Note: This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications.
  

• 我们所提供的产品仅供科研使用，不得用于临床诊断、治疗、食品或者化妆品等用途！在您向我们订购产品之时，表明您已经知晓我们的产品仅做科研用途，并遵守法律法规！

1.产品价格问题

价格以本公司的实际报价为准，市场行情波动，网上报价仅供参考。

2.关于产品质量问题

所有的商品我们公司在发货之前都进行严格质检，确保无任何问题才发货。

3.关于产品属性

下单之前或者购买之前，一定要与客服电话微信沟通，核对产品的属性数量等信息确保无误。

4.关于运输方式

长期合作快递公司：顺丰，申通，韵达，顺丰，圆通快递；

合作物流：德邦物流，华宇物流，中铁快运，DHL快运等等。

可根据客户需求发快递或物流。

5.其他服务

如果您对产品服务及产品质量技术指标有特殊要求，请提前通知我方。

6.服务宗旨

产品量大价优，欢迎订购，以客户为中心，诚信双赢的核心价值观，积极够造良好的客户关系和服务理念，为客户创造较高价值，客户的满意就是我们的追求。

产品介绍