液相色谱直接测定毛发中的组氨酸含量

组氨酸是复合氨基酸，一种非必需氨基酸，具有多种生理生化功能，除了清除细胞内氧化物和参与免疫调节，还可以缓解负氮平衡，使血细胞比溶上升等。在药物生产和临床中具有重要额地位和意义。通常测定组氨酸的检查过程采用抽血的方法，而在实验中微源实验室查阅文献资料实验了一种利用毛发组织和液相色谱直接检测组氨酸的检测方法。

制备标准储备溶液：精密称取组氨酸标准品3mg置于容量瓶中，加0.1moL／L盐酸溶解，稀释至刻度后摇匀，配制为1000mg／L的标准储备液。临用时现配现用。另准备胱氨酸、酪氨酸标准品同组氨酸操作。

制备混合标准工作溶液：制得混合标准工作溶液I(胱氨酸25mg/L、组氨酸3mg/L、酪氨酸10mg/L)、Ⅱ(胱氨酸125mg/L、组氨酸15mg/L、酪氨酸mg/L、Ⅲ(胱氨酸250mg/L、组氨酸30mg/L、酪氨酸100mg/L)、Ⅳ(胱氨酸375mg／L、组氨酸45mg／L、酪氨酸150mg/L)，

取用动物毛发，用l％的洗洁精超声振荡重复洗涤3次后，超纯水将毛发样品漂洗干净，仪器干燥后剪刀剪碎，称取洗净剪碎后的毛发样品100mg（精确到0.01mg），置于不锈钢水热合成反应釜中，加入6moL／L的盐酸5mL，高温水解后滴取水解液2mL，用20moL／L氢氧化钠调至pH=2.0，经0.25μm微孔滤膜过滤至10mL容量瓶中，用水稀释至刻度后摇匀作为供试品溶液。色谱条件设置如下：

色谱柱	TitankC18(4.6mm×250mm，5μm)
流动相	10mmoL／L磷酸氢二铵溶液，B为乙腈
流速	1.0mL／min

量取混合标准工作溶液I、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、V与供试品溶液各100μL进行液相色谱分析，得到色谱图如下（1-胱氨酸、2-组氨酸、3-酪氨酸）。以组氨酸的质量浓度(x，mg／L)为横坐标，对应的峰面积(y)为纵坐标绘制标准曲线。

按照标准曲线法以峰面积计算供试品中组氨酸的浓度。相关系数为0.9996，线性关系良好且稳定性佳。直接利用HPLC分析方法检测组氨酸含量的方法简便快 捷，结果准确，且避免了复杂的衍生化操作以及昂贵仪器的损耗，可以作为批量组氨酸测试的检测方式。

公司介绍：

微源检测，是集研发分析测试服务、药质量研究、基因毒杂质研究、元素杂质研究、结构确认、生物药分析服务等一体，面向全球的独立第三方生物医药研发测试服务公司。

由国内领xian的科学服务企业上海泰坦科技股份有限公司（简称：泰坦科技）参股成立，秉承“让检测精zhun又高xiao”的价值观：

l资质实验室CMA,CNAS，按照ISO-17025和GMP要求建立的实验室

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