RT-Exo RNA恒温快速扩增试剂盒(荧光型)

RNA扩增，荧光检测


一. 原理概述：
本试剂盒基于一种常温恒温核酸快速扩增技术：在常温恒温下，特殊修饰的反转录酶利用特异性引物DNA和模板RNA合成cDNA链，反应体系中的重组酶、单链DNA结合蛋白和DNA聚合酶以新合成的cDNA链为模板进行快速核酸扩增反应。本试剂盒在42 oC下，依赖核酸外切酶的作用，加入根据模版设计的特异的分子探针，使用荧光监测设备能实现对目标片段扩增过程的实时监控。适用于实验室级别的RNA扩增以及其他检测用途的RNA扩增使用。

二. 产品特点：
本试剂盒具有灵敏度高、特异性强、反应时间短（仅需20 mins）等优点，反应组分为干粉状态，操作简便，易于保存。
可适用于各种品牌的荧光定量PCR仪，恒温荧光扩增仪器等荧光检测设备。

三. 引物设计：
1. 建议使用长度在30-35 bp的引物，引物过短会影响扩增速度和检测灵敏度；
2. 碱基排布随机性高，GC 含量在 30%-70%之间；
3. 引物设计避免形成二级结构而影响扩增；
4. 扩增子长度建议在150-300 bp，通常不超过500 bp。

四. 荧光探针设计：
在上下游引物中间，设计一段长度为 46-52nt 与目的片段互补的序列作为荧光探针；
探针序列不与特异性引物识别位点重叠，长度为46-52 nt，序列避免回文序列、内部二级结构和连续的重复碱基。