nfo-DNA恒温快速扩增试剂盒(胶体金试纸条型)

用于DNA扩增，试纸条检测

一. 原理概述：
本试剂盒基于一种常温恒温核酸快速扩增技术：在常温恒温下，重组酶和引物形成蛋白/单链核苷酸的复合体Rec/ssDNA，在辅助蛋白和单链结合蛋白SSB的帮助下，侵入双链DNA模板；在侵入位点形成D-loop区域，并开始对DNA双链进行扫描；待找到与引物互补的目的区域后，复合体Rec/ssDNA解体的同时，聚合酶也结合到引物的3’末端，开始链的延伸。依赖nfo酶的作用，加入根据模版设计的特异的分子探针，使用胶体金技术（三明治夹心法）可以对最终结果进行检测。

二.产品特点：
本试剂盒具有灵敏度高、特异性强、反应时间短（仅需12 mins）等优点，反应组分为干粉状态，操作简便，易于保存。
本试剂对设备要求低，金属浴、水浴锅等即可进行反应操作，无需购买PCR扩增仪等价格高昂的专属设备。

三.引物设计：
1. 建议使用长度在 30-35 bp的引物，引物过短会影响扩增速度和检测灵敏度；

2.碱基排布随机性高，GC 含量在 30%-70%之间；

3.下游引物的5’端标记一个修饰基团（常用生物素Biotin）；

4.引物设计避免形成二级结构而影响扩增；

5.扩增子长度建议在150-300 bp，通常不超过500 bp。

四.荧光探针设计：
在上下游引物中间，设计一段长度为 46-52nt 与目的片段互补的序列作为胶体金探针；
探针序列不与特异性引物识别位点重叠，长度为 46-52 nt，序列避免回文序列、内部二级结构和连续的重复碱基。