DMEM培养基是一种含各种氨基酸和葡萄糖的培养基,是在MEM培养基的基础上研制的。与MEM比较增加了各种成分用量,同时又分为高糖型(低于4500mg/L)和低糖型(低于1000mg/L)。高糖型有利于细胞停泊于一个位置生长,适于生长较快、附着较困难肿瘤细胞等。 [1]
DMEM是 dulbecco"s modified eagle medium的缩写,所以其特点主要包括以下:(1)氨基酸含量为依格尔培养基的2倍,且含有非必需氨基酸,如甘氨酸等;(2)维生素含量为依格尔培养基的4倍;3)含有糖酵解途径中的重要物质--丙酮酸;(4)含有微量的铁离子。经典的培养基有很多种,其中 DMEM、 RPMI 1640、 MEM 、 DMEM/F12 都是应用最广泛的培养基。其他 如 M199 、 IMDM 、 L15培养基等也用于某些细胞的培养。其具体的特征及应用如下:
1、BME细胞培养基
基础Eagle培养基(Basal Medium Eagle),1955年Eagle设计,BSS+12种氨基酸+谷氨酰胺+8种维生素。简单、便于添加,适于各种传代细胞系和特殊研究用,在此基础上改良的细胞培养基品种有MEM、DMEM、IMDM等。
2、MEM细胞培养基
又称低限量Eagle培养基(Minimal Essential Medium),1959年在Eagle"s基础培养基(BME)上修改而来,删去赖氨酸、生物素,氨基酸浓度增加,适合多种细胞单层生长,有可高压灭菌品种,是一种最基本、试用范围最广的培养基,但因其营养成分所限,针对生产之特定细胞培养与表达时,并不一定是使用效果最佳或者最经济的培养基。
3、DMEM细胞培养基
DMEM是由Dulbecco改良的Eagle培养基,起初是为小鼠成纤维细胞设计的。DMEM的氨基酸浓度是MEM的两倍,维生素浓度是MEM的4倍,采用双倍的HCO3-和CO2浓度起到更好的缓冲作用。最初的配方中葡萄糖含量为1000 mg/L,后来为了某些细胞的生长需要,将葡萄糖含量又调整为4500 mg/L,这就是大家常说的低糖和高糖了。
低糖适于依赖性贴壁细胞培养,特别适用于生长速度快、附着性较差的肿瘤细胞培养。高糖更适合高密度悬浮细胞培养,也适用于附着性较差,但又不希望它脱离原来生长点的克隆培养,也可用于杂交瘤中骨髓瘤细胞和DNA转染的转化细胞的培养。例如CHO细胞表达生产乙肝疫苗、CHO细胞表达EPO。
4、IMDM细胞培养基
Guilber 和Iscove将Dulbecco" Medium 改良为 Iscove"s Medium,用于培养红细胞和巨噬细胞前体。此种培养液含有硒、额外的氨基酸和维生素、丙酮酸钠和HEPES。并用硝酸钾取代了硝酸铁。IMDM还能够促进小鼠B淋巴细胞,LPS刺激的B细胞,骨髓造血细胞,T细胞和淋巴瘤细胞的生长。IMDM为营养非常丰富的培养液,因此可以用于高密度细胞的快速增殖培养。
5、RPMI-1640细胞培养基
Moore等人于1967年在Roswell Park Memorial Institute研制,针对淋巴细胞培养设计,含BSS+21种氨基酸+维生素11种等。现也用于悬浮细胞培养,如哺乳动物、特殊造血细胞、正常或恶性增生的白细胞,杂交瘤细胞的培养,其它像K-562、HL-60、Jurkat、Daudi、IM-9等成淋巴细胞、T细胞淋巴瘤细胞以及HCT-15上皮细胞等均可参考使用。
6、HamF10细胞培养基
1963年Ham设计,含微量元素,可在血清含量低时用,适用于克隆化培养。F10适用于仓鼠、人二倍体细胞,特适于羊水细胞培养。
7、DMEM/F12细胞培养基
Ham"s F12是为在低血清浓度下克隆CHO细胞而设计的,现在也广泛应用于克隆形成率的分析及原代培养。F12还可以与DMEM等体积混合使用,得到一种高浓度与成分多样化相结合的产物,这种培养基已应用于许多原代培养及更难养的细胞系的培养。由于营养成分丰富,且可以使用较少血清,故也常作为无血清培养基的基础培养基。
8、M199细胞培养基
1950年Morgan等设计的具有确定化学成分的细胞培养液,即M-199。除BSS外,含有53种成分,为全面培养基,主要用于鸡胚成纤维细胞培养。此培养液必须辅以血清才能支持长期培养。M-199可用于培养多种种属来源的细胞,并能培养转染的细胞。现广泛用于病毒学、疫苗生产。
9、McCoy5A培养基
1959年MeCoy为肉瘤细胞设计,BSS+40种成分。可支持多种(如骨髓、皮肤、肺和脾脏等)的原代移植物的生长,除适于一般的原代细胞培养外,主要用于作组织活检培养、一些淋巴细胞培养以及一些难培养细胞的生长支持。例如Jensen大鼠肉瘤成纤维细胞、人淋巴细胞、HT-29、BHL-100等上皮细胞。
YC-3001 | MEM培养基(含NEAA) | 含非必需氨基酸,Earle’s混合盐,1000mg/L D-葡萄糖,292mg/L L-谷氨酰胺,2200mg/L碳酸氢钠。pH值7.0-7.4。 | 500 ml | ¥68.00 |
YC-3002S | MEM培养基(含NEAA,双抗) | 含非必需氨基酸,Earle’s混合盐,1000mg/L D-葡萄糖,292mg/L L-谷氨酰胺,2200mg/L碳酸氢钠。青霉素100U/ml,链霉素100μg/ml。pH值7.0-7.4。 | 500 ml | ¥88.00 |
YC-3003H | MEM培养基(含NEAA,不含碳酸氢钠) | 含非必需氨基酸,Earle’s混合盐,1000mg/L D-葡萄糖,292mg/L L-谷氨酰胺,10mM HEPES。不含碳酸氢钠。pH值7.0-7.4。 | 500 ml | ¥150.00 |
YC-3004HS | MEM培养基(含NEAA,不含碳酸氢钠含双抗) | 含非必需氨基酸,Earle’s混合盐,1000mg/L D-葡萄糖,292mg/L L-谷氨酰胺,10mM HEPES。不含碳酸氢钠。青霉素100U/ml,链霉素100μg/ml。pH值7.0-7.4。 | 500 ml | ¥160.00 |
YC-3005T | MEM培养基(丙酮酸钠) | 含1mM丙酮酸钠,Earle’s混合盐,1000mg/L D-葡萄糖,292mg/L L-谷氨酰胺,2200mg/L碳酸氢钠。pH值7.0-7.4。 | 500 ml | ¥160.00 |
YC-3006TS | MEM培养基(丙酮酸钠含双抗) | 含1mM丙酮酸钠,Earle’s混合盐,1000mg/L D-葡萄糖,292mg/L L-谷氨酰胺,2200mg/L碳酸氢钠。青霉素100U/ml,链霉素100μg/ml。pH值7.0-7.4。 | 500 ml | ¥180.00 |
YC-3007 | α- MEM培养基(含核糖核酸和脱氧核糖核酸) | 含核糖核酸和脱氧核糖核酸,1000mg/L D-葡萄糖,292 mg/L L-谷氨酰胺,110mg/L丙酮酸钠,2200mg/L碳酸氢钠。pH值7.0-7.4。 | 500 ml | ¥125.00 |
YC-3008 | α- MEM培养基(含核糖核酸和脱氧核糖核酸,含双抗) | 含核糖核酸和脱氧核糖核酸,1000mg/L D-葡萄糖,292 mg/L L-谷氨酰胺,110mg/L丙酮酸钠,2200mg/L碳酸氢钠。青霉素100U/ml,链霉素100μg/ml。pH值7.0-7.4。 | 500 ml | ¥135.00 |
YC-3009 | MEM培养基M(不含NEAA) | 不含非必需氨基酸,含Earle’s混合盐, 1000 mg/L D-葡萄糖,292mg/L L-谷氨酰胺,2200mg/L碳酸氢钠。pH值7.0-7.4。 | 500 ml | ¥180.00 |
YC-3010S | MEM培养基(不含NEAA,含双抗) | 不含非必需氨基酸,含Earle’s混合盐, 1000 mg/L D-葡萄糖,292mg/L L-谷氨酰胺,2200mg/L碳酸氢钠。青霉素100U/ml,链霉素100μg/ml。pH值7.0-7.4。 | 500 ml | ¥190.00 |
YC-3011 | MEM培养基(不含酚红) | 不含酚红。含1000 mg/L D-葡萄糖,292mg/L L-谷氨酰胺,1mM丙酮酸钠,2200mg/L碳酸氢钠。pH值7.0-7.4。 | 500 ml | ¥180.00 |
YC-3012S | MEM培养基(不含酚红、NEAA) | 不含酚红和非必需氨基酸。含1000 mg/L D-葡萄糖,292mg/L L-谷氨酰胺,1mM丙酮酸钠,2200mg/L碳酸氢钠。青霉素100U/ml,链霉素100μg/ml。pH值7.0-7.4。 | 500 ml | ¥200.00 |