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配制不同离子强度的Tris缓冲剂

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湖北新德晟材料科技有限公司
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Tris缓冲剂是生物缓冲剂中应用比较普遍的一类,主要是因为其合成方便、缓冲能力强,而且有着离子强度低的优势。而有些体系中,需要缓冲液要有特定的离子强度,那么怎么配制不同离子强度的Tris缓冲剂呢?

Tris生物缓冲剂大包装

缓冲液离子强度定义

想配制Tris缓冲液,还是比较简单的,只需要往Tris溶液中添加不同比例的盐酸HCl,即可得到不同pH值的缓冲溶液,用pH计进行pH的测定也比较简单,而要控制缓冲液不同的离子强度就要复杂一点了。缓冲液离子强度是溶液中所以离子质量浓度的函数,为所有离子质量浓度与对应离子电荷数平方乘积的求和的一半。

弱电解质水解离子的含量

需注意的是,缓冲液离子强度中的浓度是质量浓度,并非体积浓度。像Tris、Bicine、MOPS等缓冲剂,都属于弱电解质,在水溶液中并不是完全解离。比如说0.1M的Tris溶液,并不是全部的Tris都解离了,部分在溶液中以分子形态存在,可以根据解离平衡以及特定温度下的解离常数pKa和Tris浓度,计算出其解离出的离子浓度,体积浓度换算成质量浓度即可。Cl-离子是完全解离由盐酸的量得出,H+和OH-离子由pH计算出,然后再根据各离子的浓度即可计算出离子强度。

调节Tris缓冲液离子强度

已经配制好特定浓度、调节好pH的缓冲液,该温度下的离子强度也基本确定,如果此时离子强度不符合要求呢?首先增加或减少HCl的量都是不行的,会改变缓冲液的pH值。这时候我们可以添加NaCl(或KCL),因为是强电解质完全解离,可直接计算称量添加量来调节离子强度。但如果需要降低离子强度呢,就不能添加电解质了,只有减低Tris含量以稍微降低离子强度了,因Tris具有缓冲性能,稍微稀释不会影响其pH值。

至于缓冲液中解离平衡与离子强度的具体计算,就需要自行查阅资料了,也可以通过专门软件计算离子强度。德晟是生物缓冲剂厂家,可提供Tris、MOPS、HEPES等多种缓冲剂大包装。

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