siRNA 转染试剂 Omifection-R
一、产品简介。
Omifection-R 是一款专门用于 siRNA 转染的试剂,转染效率高,细胞毒性低,在多种细胞系及原代细胞中都表现出良好的转染效果。
二、运输与存储条件。
本产品常温运输, 4℃ 保存、严禁冻存。
三、特点与优势。
1. 转染效率高。与 Lipofectamine 2000 或 RNAi Max 等转染试剂的转染效率类似。
2. 细胞毒性低。在多种类型的细胞转染实验中,Omifection-R 没有表现出细胞毒性。
3. 使用方便。本产品不受血清和抗生素的影响,转染前不用更换细胞培养液。
四、使用说明。
1. 以 6 孔细胞培养板培养的贴壁细胞为实验体系,转染实验流程如下:
2. 细胞培养。胰酶消化法收集细胞并计数,接种到 6 孔细胞培养板,培养 24 h 后细胞密度达到30%-50%。(细胞密度太大不利于转染)
3. siRNA 制备。利用 RNase-free ddH2O 溶解 siRNA 干粉,终浓度为 20 μM,即利用 125 μL 的RNase-free ddH2O 溶解 1 OD(33 μg 或 2.5 nM)siRNA 干粉,充分震荡(vortex)使其溶解。
4. 转染复合体制备。准备 2 个无菌 EP 管,各加入 100 μL OPTI-MEM 培养液 (Gibco),其中一管加入 6 μL Omifection-R,混合 10 次,室温静置 5 min。另外一管加入 6 μL siRNA(20 μM)溶液,混匀。将 Omifection-R 混合液滴加到 siRNA 混合液中,混匀,室温静置 30 min(5-30min,但孵育 30 min 转染效果更好),制备转染复合体。
5. 细胞转染。将转染复合体滴加入细胞培养液中,轻摇混匀,转入 CO2 培养箱中继续培养。
6. 换液。转染 6-12 h,更换成新鲜的细胞培养液。若无明显细胞毒性,也可不用换液。
7. 转染 24-48 h,利用 RT-PCR 检测目的基因 mRNA 表达水平,或利用 Western blot 检测目的蛋白表达水平。
五、注意事项。
1. 请利用对数生长期细胞进行转染,以提高转染效率。
2. 转染 siRNA 时,细胞密度以 30-50%为宜。
3. 增加 Omifection-R 用量可以提高转染效率,但也可能增加细胞毒性。
六、转染效果鉴定。

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注意:
1. 本产品仅供科研使用。请勿用于医药、临床诊断或治疗,食品及化妆品等用途。请勿存放于普通住宅区。
2. 为了您的安全和健康,请穿好实验服并佩戴一次性手套和口罩操作。
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