油红O染色试剂盒

产品编号	试剂名称	规格	保存条件
Oms-01	固定液（4%多聚甲醛）	50 ml	-20 ℃
	油红 O 染液（存储液）	30 ml	RT 避光保存
	苏木素染液（Mayer）	50 ml	4 ℃ 避光保存
	说明书	1 份

一、产品简介。

油红 O 染液的主要成份 1-［2,5-二甲基-4-(2,5-二甲基苯偶氮)苯偶氮］-2 萘酚对脂肪具有很强的亲和性，结合细胞或组织中的脂肪后使脂滴呈现橙黄色至红色（因脂肪含量而异），随后的苏木素染液使细胞核染成蓝色，进而分析细胞或组织中脂滴的多少与分布。

二、运输与存储条件。

本产品低温运输，并按各组份保存条件分开保存，有效期 12 个月。

三、特点与优势。

1. 本试剂可以对细胞或组织中的脂肪进行染色，脂滴染色清晰。

2. 本产品为即用型试剂，操作方便，快速。

四、自备试剂与耗材。

60%异丙醇、去离子水（ddH2O）、PBS

五、使用说明。

1. 油红 O 工作液配制。计算需要的油红 O 工作液体积，将油红 O 存储液与ddH2O 按照 3:2 的比例混匀，室温静置 10 min，过滤，备用。

2. 细胞染色。

1) 细胞培养与成脂诱导。HepG2 或其它细胞传代后接种到 6 孔细胞培养板中，24 h 后细胞密度达到 70%左右，加入 1 mM 的游离脂肪酸（FFA）处理，诱导脂肪生成。

2) 成脂效果检测。成脂诱导 24 h，显微镜下观察，若细胞内出现透亮的脂滴，说明成脂诱导实验成功。

3) 固定。弃细胞培养液，PBS 洗涤 1-2 次，加入 1 ml 固定液（4%多聚甲醛）室温固定 20-30 min，弃固定液，ddH2O 洗涤 2 次。

4) 60%异丙醇润洗。加入 60%异丙醇，1 ml/孔，静置 5 min，弃异丙醇。

5) 油红 O 染色。加入油红 O 工作液，1 ml/孔，室温染色10-20 min。弃油红 O 染液，ddH2O 洗涤至无多余染液。

6) 苏木素染色。加入苏木素染液，1 ml/孔，室温染色 2-5 min，弃染液，ddH2O 洗涤至无多余染液。

7) 加入 ddH2O 或 PBS，1 ml/孔，显微镜下观察并拍照。

3. 组织切片染色。

1) 冰冻切片（8-10 μm）置于载玻片上，晾干。

2) 固定。将冰冻切片置于固定液中固定20-30 min，ddH2O 洗涤 3 次。

3) 60%异丙醇润洗。将冰冻切片置于60%异丙醇中，室温静置 5 min，捞出，稍微晾干。

4) 油红 O 染色。将冰冻切片置于油红 O 工作液中，室温染色 20-30 min。捞出，ddH2O 洗涤至无多余染液。

5) 苏木素染色。将冰冻切片置于苏木素染液中，室温静置 2-5 min，捞出，ddH2O 洗涤至无多余染液。

6) 滴加 ddH2O 或 50%甘油封片，显微镜下观察并拍照。

六、注意事项。

1. 油红 O 工作液应现用现配，不宜久放，容易失效。

2. 油红 O 工作液尽量过滤一下，以免沉淀影响实验结果。

3. 若室内温度太低，油红 O 工作液可以在 60 ℃水浴锅中孵育 10-30 min，增强染色效果。

4. 细胞和组织切片不宜用乙醇固定，影响油红 O 染色效果。

5. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

注意：

1. 本产品仅供科研使用。请勿用于医药、临床诊断或治疗，食品及化妆品等用途。请勿存放于普通住宅区。
2. 为了您的安全和健康，请穿好实验服并佩戴一次性手套和口罩操作。

北京奥秘佳得医药科技有限公司有强大的生物试剂研发团队，可以提供多种生物试剂，满足您科研的需要：

北京奥秘佳得医药科技有限公司是一家以新药研发为主要方向的公司，目前公司经营范围还涉及生物试剂的研发及销售；化工产品（不含危险化学品及一类易制毒化学品）、实验室设备及辅助设备、实验室耗材等的销售。实验室试剂主要经销的品牌有：麦克林，罗恩，乐研，艾康生物，上海源叶，普西唐以及索莱宝等，客户主要为院校以及科研院所等。经销实验室设备品牌包括：天津艾杰尔，泰斯特，海尔生物医疗，东联哈尔，群安等。耗材主要有耐思NEST、爱思进Axygen等。公司网址：http://www.omiget.com/