考马斯亮蓝法测蛋白含量测定试剂盒说明书

 

注意：正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。

货号: YX-W-C201

规格: 100T/96S

产品说明：

 

 

 

微量法

样品可溶性蛋白质含量常常用于酶活性计算。此外，可溶性蛋白质含量也用于食品等质量分析。

自备仪器和用品：

紫外分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96 孔板、移液器和蒸馏水。

操作步骤：

一、吸光值测定

1. 分光光度计预热30 min 以上，蒸馏水调零。

2. 空白管：取0.5 mL EP管，加入40μL 蒸馏水，250μL 试剂一，混匀后室温静置10min，取200μL 于微量玻璃比色皿/96孔板，595nm 比色，10~20min 完成比色，记为A 空白管。

3. 标准管：取0.5 mL EP管，加入40μL 标准液，250μL 试剂一，混匀后室温静置10min，取200μL 于微量玻璃比色皿/96孔板，595nm 比色，10~20min 完成比色，记为A 标准管。

4. 测定管：取0.5 mL EP管，加入40μL 待测液，250μL 试剂一，混匀后室温静置10min，取200μL 于微量玻璃比色皿/96孔板，595nm 比色，10~20min 完成比色，记为A 测定管。

二、蛋白质含量：

C 待测（μg/mL）=50×(A 测定管-A 空白管)÷(A 标准管-A 空白管)

C 标准管：标准品蛋白质浓度，50μg/mL。

注意事项：

1. 加考马斯亮蓝后，在10~20min 内吸光值相对较稳定，因此须在10~20min 完成比色。

2. 不宜用石英比色皿，可用玻璃或塑料比色皿，测完成后立即用95%乙醇冲洗。

3. 测定前用1~2 个样做预实验，确保蛋白浓度在0~100μg/ml 范围内，否则需要做相应稀释。