土壤铵态氮试剂盒说明书

可见分光光度法

注意：正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。 

产品组成： 

提取液：液体55mL×1瓶，4℃保存。 

试剂一：粉剂×2瓶，4℃避光保存。临用前根据用量每瓶加10mL双蒸水溶解，现配现用。 

试剂二：液体20mL×1瓶，4℃避光保存。 

试剂三：液体5mL×1瓶，4℃保存。 

产品说明：

土壤中的铵态氮可被土壤胶体吸附，呈交换性铵状态氮肥，也可溶解在土壤溶液中，能直接被植物吸收利用，属于速效性氮素。 

土壤中的铵态氮在强碱性介质中与次氯酸盐和苯酚作用，生成水溶性染料靛酚蓝，在625nm处有特征吸收峰，吸光值与铵态氮含量成正比。 

自备实验用品及仪器： 

天平、常温离心机、可见分光光度计、1 mL玻璃比色皿，振荡仪。 

操作步骤：

一、样本处理 

按照土壤质量（g）：提取液体积(mL)为1：5~10的比例（建议称取约0.1g新鲜土样，加入1mL提取液），振荡提取1h，10000g ，25℃离心10min，取上清液待测。

二、测定操作表

	空白管	测定管
样本（μL）		100
提取液（μL）	100
试剂一（μL）	400	400
试剂二（μL）	400	400
充分混匀，25℃静置1h
试剂三（μL）	100	100
充分混匀，于1mL玻璃比色皿，蒸馏水调零，测定625nm处吸光值A，分别记为A空白管和A测定管，△A=A测定管-A空白管

三、计算公式 

标准曲线：y = 0.3672x-0.0377，R²= 0.9993

NH4+—N含量（mg/kg）=（△A+0.0377）÷ 0.3672×V反总÷（W×V样÷V样总） 

= 27.23×（△A+0.0377）÷W

V反总：反应总体积，1mL；V样：反应体系中加入样本体积，0.1mL；V样总：加入提取液体积，1mL，W：样本质量，g

注意事项： 

1. 试剂一必须避光低温保存，配制好的试剂一4℃保存不能超过20天。 

2. 浸提液最好在当日完成测定，如果不能完成，可冷冻保存，但不能超过两天。